DAB2IP在結直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機制.pdf

1、南方醫(yī)科大學2011級博士學位論文DAB2IP在結直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機制ThefunctionandmolecularmechanismsofDAB0lecUlarmecIian2IPin么lt，Ininvasionandmetastasisofcolorectalcancer課題來源：廣東省高校學科與專業(yè)建設專項基金學位申請人王艦梅導師姓名丁彥青梁莉?qū)I(yè)名稱病理學與病理生理學培養(yǎng)類型學術型培養(yǎng)層次博士研究生所在學院基礎醫(yī)學院20

2、14年5月17日廣州摘要13catenin而實現(xiàn)的。DAB2IP通過VEGFR3調(diào)節(jié)腫瘤血管和淋巴管生成。本課題組研究還發(fā)現(xiàn)DAB2IP表達下調(diào)與肝癌的演進和預后不良密切相關。目前有關DAB2IP在結直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的轉(zhuǎn)錄調(diào)控及作用機制尚不清楚。本研究將揭示結直腸癌中DAB2IP基因的轉(zhuǎn)錄調(diào)控及組蛋白修飾新機制，探討Snail／DAB2IP正反饋通路對結直腸癌增殖、EMT、侵襲及轉(zhuǎn)移的影響，檢測Snail／DAB2IP正反饋軸在結直腸

3、癌組織中的表達及預后價值；旨在闡明DAB2IP在結直腸癌侵襲和轉(zhuǎn)移中的作用機制，為結直腸癌轉(zhuǎn)移的早期預警、預后評估提供潛在應用靶點。研究方法1DAB2IP沉默對結直腸癌細胞體內(nèi)外生物學特性的影響1)利用RealTimePCR和Westernblot檢測8種結直腸癌細胞株DAB2IP的表達。2)DAB2IP的CDS區(qū)3399bp，上下游GC含量差異較大，多次構建DAB2IP過表達載體均失敗。采用慢病毒感染的方法構建穩(wěn)定干擾DAB2IP細胞

4、株(SW480／SiDAB2IP1／2、HCTll6／SiDAB2IP1／2)和對照細胞株(SW480／NC、HCTl16／NC)，并使用RealTimePCR和Westernblot鑒定其干擾效率。3)采用MTT、平板克隆形成實驗、流式檢測周期、凋亡實驗檢測干擾DAB2IP后對細胞增殖能力、克隆形成能力、周期和凋亡的影響；采用細胞粘附實驗檢測干擾DAB2IP后對細胞粘附能力的影響；采用小室遷移實驗，小室侵襲實驗、Westernblot