乳腺癌組織中Maspin基因的mRNA表達(dá)與微小轉(zhuǎn)移及淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的關(guān)系.pdf

1、目的：乳腺癌是婦女最常見的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率占婦女腫瘤的31﹪，幾乎所有的死亡原因都是遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。就診時(shí)95﹪的患者在體檢、生化、影像檢查無遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移證據(jù)，甚至在手術(shù)徹底切除病灶和組織學(xué)腋窩淋巴結(jié)沒有受侵的情況下，仍有30﹪的患者5年內(nèi)出現(xiàn)復(fù)發(fā)和轉(zhuǎn)移。如何期將具有潛在轉(zhuǎn)移危險(xiǎn)的患者篩選出來，給予積極治療，是提高乳腺癌生存率的關(guān)鍵所在。Maspin基因作為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移潛能的抑制因子，可能成為乳腺癌轉(zhuǎn)移及預(yù)后評(píng)估的一個(gè)重要指標(biāo)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用

2、逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(RT-PCR)方法對(duì)30例原發(fā)性乳腺癌組織中Maspin基因的mRNA表達(dá)進(jìn)行檢測(cè)，同時(shí)抽取外周血檢測(cè)乳腺組織特異性標(biāo)志物hMAM(人乳腺球蛋白)的基因表達(dá)，結(jié)合病人淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況，探討Maspin基因表達(dá)與乳腺癌轉(zhuǎn)移的關(guān)系。以期為乳腺癌的微小轉(zhuǎn)移、生物學(xué)特性及預(yù)后推斷提供一種新的有效途徑。 方法：選取我院新治乳腺癌病人30例，均經(jīng)病理證實(shí)為浸潤性導(dǎo)管癌，其中有腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移8例，無腋窩淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移22例。麻醉

3、后術(shù)前抽取肘靜脈血10ml，淋巴細(xì)胞分離液分離出單核細(xì)胞，加入 Trizol液1ml于-20℃冰箱保存。術(shù)中切取病灶后解剖出癌結(jié)節(jié)，一半送術(shù)中病理，一半經(jīng)磷酸緩沖液處理后立即放入液氮中保存，轉(zhuǎn)移至實(shí)驗(yàn)室-70℃冰箱保存。上述標(biāo)本首先分別提取總RNA，然后以RNA為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA，再以cDNA為模板進(jìn)行體外擴(kuò)增反應(yīng)，同時(shí)加入內(nèi)參照。擴(kuò)增產(chǎn)物凝膠電泳，紫外燈下觀察結(jié)果。所有資料采用采用SPSS12.0統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行X<'2>檢驗(yàn)，P

4、<0.05，差異在統(tǒng)計(jì)學(xué)上有顯著意義。 結(jié)果：外周血提取的RNA均可擴(kuò)增出一條528bp的GAPDH條帶，hMAM的擴(kuò)增條帶為361bp；所有乳腺癌組織提取的RNA均可擴(kuò)增出一條294bp的GAPDH條帶，Maspin的擴(kuò)增條帶為129bp。1、在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的8例病人中，Maspin表達(dá)陰性87.5﹪(7/8)，在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的22例病人中，Maspin表達(dá)陰性31.8﹪(7/22)。兩組比較有顯著差異。2、在外周血hMAM表

5、達(dá)陽性組中，Maspin表達(dá)陰性73.3﹪(11/15)；在外周血hMAM表達(dá)陰性組中，Maspin表達(dá)陰性20﹪(3/15)，兩組比較有顯著差異。3、在有淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的8例病人中，hMAM表達(dá)陽性100﹪(8/8)，在無淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的22例病人中，hMAM表達(dá)陽性31.8﹪(7/22)。兩組比較有顯著差異。 結(jié)論：Maspin基因作為腫瘤侵襲和轉(zhuǎn)移潛能的抑制因子，在出現(xiàn)淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移或微小轉(zhuǎn)移的乳腺癌病人中，其乳癌組織中mRNA表達(dá)缺