RNAi技術(shù)干擾喉癌Hep-2細胞c-myc基因的實驗研究.pdf

1、喉癌是耳鼻咽喉科常見惡性腫瘤，發(fā)病率高，嚴重影響人們的生活質(zhì)量。 RNA干擾(RNAinterference，RNAi)現(xiàn)象發(fā)現(xiàn)于1995年，1998年引起人們的重視。RNAi是由雙鏈RNA介導的、在轉(zhuǎn)錄后水平封閉或沉默相應基因表達的新基因阻斷技術(shù)，近幾年成為基因治療研究的熱點。其原理是小片段RNA(siRNA)利用堿基互補的原理，特異性地結(jié)合癌基因的mRNA，干擾其翻譯、轉(zhuǎn)錄形成蛋白質(zhì)的功能，阻抑癌蛋白的生成。使癌細胞向成熟方

2、向分化或誘導細胞凋亡，從而達到抑制腫瘤細胞增殖的目的。原癌基因c-myc是myc基因家族的重要成員，其產(chǎn)物屬核蛋白類的磷酸化蛋白質(zhì)，在正常細胞的增殖、分化及凋亡過程中起重要作用。大量研究表明c-myc基因過度表達與多種頭頸腫瘤的發(fā)生密切相關(guān)。 喉癌和其它腫瘤一樣，是一種多基因性，多步驟，多階段的發(fā)生過程，發(fā)病機制復雜，治療困難。是否可以利用RNAi技術(shù)沉默喉癌細胞中活躍的癌基因c-myc的表達，以達到阻止或減緩腫瘤細胞生長的目的

3、尚屬未知領(lǐng)域。在c-myc癌基因受到干擾之后其它癌基因的表達是否受到影響也是值得探討的課題。在腫瘤的化療方面，如癌基因受到干擾，是否可以提高腫瘤細胞對化療藥物的敏感性也是很有意義的探索。基于上述考慮本實驗采用脂質(zhì)體包裹技術(shù)將c-mycsiRNA轉(zhuǎn)染喉癌Hep-2細胞系，沉默c-myc基因的表達，利用不同方法觀察其對癌細胞增殖、凋亡的影響。目前，在喉癌方面，RNAi技術(shù)的應用鮮有報道，干擾c-myc基因的文獻國內(nèi)、外尚未見報道。