MD-2、GM2A基因多態(tài)性與新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎的關(guān)系.pdf

1、研究背景：
　　新生兒壞死性小腸結(jié)腸炎(NEC)是一種發(fā)生于新生兒的嚴(yán)重胃腸道炎癥性疾病,其發(fā)病率和病死率均較高。目前,NEC的病因和發(fā)病機(jī)制尚不完全明確,也無確切有效的預(yù)防和治療方法。研究表明:早產(chǎn)、低出生體重、人工喂養(yǎng)、缺氧缺血、細(xì)菌感染等是NEC發(fā)病的危險(xiǎn)因素;生后細(xì)菌定植過程中的異常免疫反應(yīng)以及遺傳易感性被認(rèn)為在NEC的發(fā)病中具有重要作用。髓樣分化蛋白-2(MD-2)和GM2活化蛋白(GM2A)都是MD-2相關(guān)性脂質(zhì)識別(

2、ML)家族的成員,MD-2是Toll樣受體-4(TLR4)信號通路中識別脂多糖的CD14-TLR4/MD-2受體復(fù)合體的必不可少的成分之一,GM2A能夠通過將血小板活化因子(PAF)轉(zhuǎn)化為無活性的lyso-PAF而抑制炎癥反應(yīng)。而TLR4信號通路和PAF在NEC的發(fā)病中均具有重要作用。雖然研究表明MD-2和GM2A在NEC發(fā)病中發(fā)揮作用,但并無關(guān)于MD-2和GM2A基因多態(tài)性與NEC關(guān)系的報(bào)道。因此,本課題從遺傳學(xué)角度,通過研究MD-2

3、和GM2A基因的單核苷酸多態(tài)性,以探討NEC的遺傳易感性。
　　研究目的：
　　1.分析2011.6～2012.6收治于廣州市婦女兒童醫(yī)療中心的42例NEC病例(Bell分期≥Ⅱ期)的臨床資料;
　　2.檢測以上42例NEC新生兒MD-2基因的多態(tài)性,闡明MD-2基因多態(tài)性與NEC的關(guān)系;
　　3.檢測以上42例NEC新生兒GM2A基因的多態(tài)性,闡明GM2A基因多態(tài)性與NEC的關(guān)系。
　　方法：
　　

4、查閱2011.6～2012.6收治于廣州市婦女兒童醫(yī)療中心的42例NEC新生兒(Bell分期≥Ⅱ期)的病歷,總結(jié)分析其臨床特點(diǎn)。用基因測序的方法對上述42例NEC病例的MD-2基因外顯子、啟動(dòng)子C-1625G多態(tài)位點(diǎn)區(qū)域和GM2A基因外顯子進(jìn)行重測序,篩查目的片段的單核苷酸多態(tài)性位點(diǎn),并將檢測到的多態(tài)位點(diǎn)與同期83例正常新生兒進(jìn)行對照,比較檢測到的功能性多態(tài)位點(diǎn)的等位基因頻率和基因型頻率在NEC組、對照組、NEC手術(shù)/非手術(shù)組、NEC足

5、月/早產(chǎn)兒組等之間的差異。
　　結(jié)果：
　　1.42例NEC中,足月兒25例,早產(chǎn)兒17例;手術(shù)病例20例,非手術(shù)病例22例。足月兒病例和早產(chǎn)兒病例比較,發(fā)病的平均日齡分別為7.2天和13.7天;7日內(nèi)發(fā)病例數(shù)所占比例分別為64.00％和29.41%(P<0.05);診斷時(shí)已為Ⅲ期(Bell分期)的病例所占比例分別為32.00%和11.76%(P>0.05);伴發(fā)其他嚴(yán)重疾病的病例所占比例分別為60.00%和23.53%(P

6、<0.05);手術(shù)率分別為56.00%和35.29%(P>0.05)。手術(shù)病例和非手術(shù)病例比較,平均胎齡和出生體重的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。
　　2.MD-2基因外顯子區(qū)域未檢測到頻率異常的多態(tài)性位點(diǎn);啟動(dòng)子區(qū)域的rs11465996位點(diǎn)的多態(tài)性在NEC組和對照組之間的差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,但NEC手術(shù)組中攜帶C低頻等位基因的基因型頻率顯著高于對照組(χ2=4.388,P=0.036)。
　　3.GM2A基因編碼區(qū)域檢

7、測到3個(gè)高頻率的多態(tài)位點(diǎn)(rs1048719、rs153477、rs1048723),位于1號外顯子的rs1048719的低頻等位基因(A)頻率和攜帶低頻等位基因的基因型頻率在NEC組和對照組之間的差異均具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。另外,本研究檢測到一個(gè)位于內(nèi)含子區(qū)域的多態(tài)性位點(diǎn)(rs2075783),C為低頻等位基因,NEC組和對照組攜帶C等位基因的基因型頻率分別為42.86%和13.25%,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05),且

8、足月兒組顯著高于早產(chǎn)兒組(P<0.05)。
　　結(jié)論：
　　1.足月兒NEC發(fā)病率增高,與早產(chǎn)兒比較,足月兒發(fā)病更早、進(jìn)展更快;危險(xiǎn)因素、病程等與早產(chǎn)兒NEC比較也有不同特點(diǎn);
　　2.MD-2基因外顯子區(qū)域的多態(tài)性與NEC的發(fā)病無關(guān),啟動(dòng)子區(qū)域的C-1625G(rs11465996)多態(tài)性與NEC的嚴(yán)重程度具有相關(guān)性;
　　3.GM2A基因1號外顯子的rs1048719多態(tài)性以及內(nèi)含子區(qū)域的rs2075783多