寧夏苯丙酮尿癥兒童苯丙氨酸羥化酶六個(gè)外顯子基因突變的研究.pdf

1、目的：苯丙酮尿癥(phenylketon，PKU)是一種比較常見(jiàn)的人常染色體隱性遺傳病。是由于肝細(xì)胞內(nèi)苯丙氨酸羥化酶(Phenylalanine hydroxylase,PAH)活性下降或顯著缺乏，致使苯丙氨酸（phenyla la nine，Phe）及其旁路代謝產(chǎn)物的堆積損害神經(jīng)系統(tǒng)等。典型的PKU患兒，一般需終身采用無(wú)（低）苯丙氨酸飲食治療，部分PKU患兒語(yǔ)言、行為障礙較嚴(yán)重的，還需配以相關(guān)的康復(fù)訓(xùn)練,所以PKU的治療給家庭和社會(huì)帶

2、來(lái)了沉重的經(jīng)濟(jì)和精神負(fù)擔(dān)。我國(guó)PKU的平均發(fā)病率為1:11180，寧夏回族自治區(qū)PKU發(fā)病率為1:3065，明顯高于全國(guó)水平。而寧夏PKU的診斷還比較滯后，仍停留在新生兒疾病篩查及血清學(xué)診斷的水平，且尚未普及PKU的遺傳咨詢及孕前干預(yù)。本研究旨在通過(guò)對(duì)寧夏回族自治區(qū)PKU兒童及其家系PAH六個(gè)外顯子的基因檢測(cè)，發(fā)現(xiàn)突變類型及高頻突變位點(diǎn)，有助于PKU兒童的早期診斷、基因診斷、遺傳咨詢及產(chǎn)前診斷，通過(guò)分析PAH突變基因型與生化表型之間的關(guān)

3、系，為臨床制定個(gè)體化治療方案提供重要的理論依據(jù)。
　　方法：選取寧夏PKU兒童和正常兒童各30例。留取PKU兒童及其父母和正常兒童的外周靜脈血樣本，對(duì)PAH基因的第3、5、6、7、11及第12外顯子分別進(jìn)行PCR擴(kuò)增、單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SSCP）及測(cè)序分析，并對(duì)PKU兒童基因型與生化表型的關(guān)系進(jìn)行研究。
　　結(jié)果：通過(guò)對(duì)30例PKU兒童PAH基因的第3、5、6、7、11和12外顯子進(jìn)行基因檢測(cè)分析，在60個(gè)等位基因中明確了51

4、個(gè)致病突變基因，總檢出率為85％?？偣舶l(fā)現(xiàn)有16種致病突變，包括錯(cuò)義突變8種、剪接突變3種、無(wú)義突變3種、同義突變1種、缺失突變1種。其中，R243Q突變的相對(duì)頻率最高，其次是Y204C、IVS4-1G＞A、R111X和IVS7+2T＞A；共發(fā)現(xiàn)兩個(gè)新的突變；另發(fā)現(xiàn)V245V和Q232Q兩個(gè)多態(tài)性改變；PKU基因型和生化表型之間存在明顯的相關(guān)性。
　　結(jié)論：研究PAH基因的六個(gè)突變熱點(diǎn)區(qū)域，明確了寧夏回族自治區(qū)PKU兒童PAH基因