血栓調(diào)節(jié)蛋白N端結(jié)構(gòu)域抗炎作用的初步研究.pdf

1、目的:
　　血栓調(diào)節(jié)蛋白(TM)主要由血管內(nèi)皮細(xì)胞分泌,通過結(jié)合HMGB1,激活蛋白C,降低凝血酶的活性而發(fā)揮抗炎、抗凝的活性。TM有三個結(jié)構(gòu)域:EGF樣結(jié)構(gòu)域——通過促進(jìn)蛋白C的形成,發(fā)揮抗凝的作用,另外兩個結(jié)構(gòu)域糖基化氧結(jié)構(gòu)域、N端樣結(jié)構(gòu)域(TM-N)功能尚不明確,本文對其結(jié)構(gòu)域之一TM-N行基礎(chǔ)性研究,設(shè)置TM-N參與不同的炎癥反應(yīng),了解TM-N在不同炎癥反應(yīng)中所起的作用及作用機(jī)制。
　　方法:
　　1.LPS及

2、HMGB1+LPS刺激RAW264.7細(xì)胞,分別加入TM-N共培養(yǎng)
　　2.免疫熒光檢測0h、2h時核因子NF-κB被激活的量
　　3.RT-PCR檢測0h、3h、6h時IL-6mRNA表達(dá)的量的變化
　　4.ELISA測定0h、1.5h、4h、8h.時細(xì)胞上清液中TNF-α,IL-1分泌的量
　　結(jié)果:
　　1.HMGB1+LPS刺激組同LPS刺激組相比較,HMGB1+LPS組6h時IL-6mRNA表達(dá)(

3、2.637±1.073)明顯高于LPS組(0.376±0.156);該組8hTNF-α(916.52±38.31)及IL-1(1396.47±135.08)均高于LPS組(分別是490.60±87.70和751.36±161.42,P值均<0.05)。
　　2.LPS+HMGB1+TM-N組與LPS+HMGB1組相比較,二組在8hTNF-α檢測值分別為307.21±39.98和916.52±38.31,IL-1分別為490.12±

4、62.79和1396.47±135.08,在6h時IL-6mRNA檢測值分別為0.318±0.216和2.637±1.073,前者均小于后者(P<0.05~0.01),且在2h時TM-N對LPS+HMGB1組NF-κB表達(dá)的抑制率達(dá)到81％(P<0.05)。
　　3.LPS+TM-N組同LPS組相比,二者8hTNF-α檢測值分別為269.59±34.27和490.60±87.70,IL-1分別為427.37±108.68和751.