兔胚胎玻璃化冷凍保存和遺傳檢測(cè)的研究.pdf

1、種質(zhì)(Germplasm)也稱種質(zhì)資源或遺傳資源，指親代通過(guò)生殖細(xì)胞或者體細(xì)胞遺傳給子代的遺傳物質(zhì)。利用超低溫冷凍技術(shù)選擇性保存一些動(dòng)物的胚胎和配子具有重要的意義。兔是非常有用和可愛(ài)的動(dòng)物，建立兔的種質(zhì)資源庫(kù)對(duì)農(nóng)業(yè)、比較醫(yī)學(xué)、生物科學(xué)研究等都具有重要意義。 本實(shí)驗(yàn)中，分別采用麥管法和冷凍管法兩種冷凍方法進(jìn)行兔胚胎冷凍保存的研究，比較了新西蘭白兔(New Zealand White Rabbit，NZWR)和青紫蘭兔(Chinch

2、illa Rabbit，CR)兩個(gè)品種之間胚胎冷凍保存效果的差異。結(jié)果表明青紫蘭兔平均排卵數(shù)42.4±8.4枚/只，多于新西蘭兔38.9±5.5枚/只，但兩者差異不顯著(P>0.05)。胚胎移植后，新西蘭兔凍融胚胎后代的活仔率為28.8％，高于青紫蘭(25.9％)，但兩者差異不顯著。凍融胚胎的總活仔效率27.5％。不同激素誘導(dǎo)超數(shù)排卵的比較中，注射ECG組的胚胎發(fā)育質(zhì)量?jī)?yōu)于FSH，移植胚胎出生后代活仔率高于FSH組，產(chǎn)仔受體的窩仔數(shù)為8

3、.2～8.4(ECG組)，高于平均值6.3(FSH組)。排卵數(shù)、凍融胚胎的活仔效率以ECG 100 IU最高(47.1±2.9、35.0％)，其次為ECG 50 IU(41.8±3.2、26.0％)，F(xiàn)SH 50 IU(45.2±5.5、23.8％)。初步超排和胚胎冷凍試驗(yàn)認(rèn)為eCG超排組的胚胎質(zhì)量高于FSH，但是ECG 50和100IU組間平均排卵數(shù)的差異不顯著。表明新西蘭成兔采用50 IU劑量的ECG進(jìn)行超排就可以得到較充分的排卵。

4、在冷凍管法冷凍兔胚胎的研究中，交配后66 h沖胚胎保存效果優(yōu)于60 h和55 h。同采用FSH誘導(dǎo)超數(shù)排卵時(shí)，冷凍管法的胚胎活仔效率高于麥管法(27.5％v.s.23.8％)。選用隨機(jī)引物擴(kuò)增多態(tài)性DNA(Random Amplifled Polymorphic DNA，RAPD)技術(shù)對(duì)新西蘭、青紫蘭、日本白兔(Japanese White Rabbit，JWR)進(jìn)行品種鑒定，結(jié)果從140條隨機(jī)引物中篩選出AD1、AD13、AD19、A