吡格列酮對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠睪丸和垂體免疫損傷的抑制作用.pdf

1、第一部分吡格列酮對(duì)鏈脲佐菌素(STZ)誘導(dǎo)的糖尿病大鼠睪丸和垂體免疫球蛋白沉積的影響 目的：糖尿病是一組以慢性血糖升高為特征的代謝性疾病群，隨病情進(jìn)展可出現(xiàn)全身各系統(tǒng)病變，嚴(yán)重影響患者生存質(zhì)量。其機(jī)制復(fù)雜，尚未完全明確。目前糖尿病治療以控制血糖為主，但這并不能完全阻斷糖尿病的病程。近年來(lái)研究表明免疫和炎癥在糖尿病及其慢性并發(fā)癥的發(fā)生中起了重要的作用，而吡格列酮為噻唑烷二酮類(lèi)藥物，是PPAR-γ的配體，作為胰島素增敏劑被應(yīng)用于臨床

2、，可能有抗炎和免疫調(diào)節(jié)的作用，故我們擬從吡格列酮對(duì)STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠多器官免疫球蛋白沉積的影響入手，探討其作用機(jī)制，同時(shí)探究糖尿病垂體和性腺病變的發(fā)病機(jī)理，為臨床治療提供理論依據(jù)。 方法：96只雄性SD大鼠，隨機(jī)抽取12只作為正常對(duì)照組(H)，其余大鼠以STZ造模，成模后進(jìn)行血糖分層，隨機(jī)分為小劑量吡格列酮治療組(A，4mg/kg/d)、大劑量吡格列酮治療組(B，20mg/kg/d)、小劑量吡格列酮加胰島素治療組(C，吡格列

3、酮4mg/kg/d加甘精胰島素4u/kg/d)、環(huán)孢素A治療組(D，環(huán)孢素A1mg/kg/d)、環(huán)孢素A加胰島素治療組(E，環(huán)孢素Almg/kg/d加甘精胰島素4u/kg/d)，胰島素治療組(F，甘精胰島素4u/kg/d)，糖尿病未治療組(G)，成模16周后處死全部動(dòng)物。留取血、尿標(biāo)本檢測(cè)血白蛋白、肝腎功能、血脂、胰島素水平、尿微量白蛋白。留取睪丸、垂體標(biāo)本做HE、MASSON染色觀察光鏡病理變化，通過(guò)免疫組化和免疫熒光染色檢測(cè)這兩個(gè)器

4、官的IgA、IgG、和IgM的沉積情況，并通過(guò)Image-ProPlus5.1進(jìn)行圖像分析。 結(jié)果：糖尿病于1周內(nèi)造模成功，16周后各組糖尿病大鼠均出現(xiàn)肌酐、尿素氮、尿蛋白的升高，吡格列酮組較糖尿病未治療組升高值低，而肝功能無(wú)明顯改變。藥物治療后各組糖尿病大鼠血糖無(wú)明顯降低，但C、E、F組空腹血糖較A、B、D、G組低(P<0.05)。糖尿病大鼠睪丸可見(jiàn)曲細(xì)精管上皮層數(shù)變薄、空泡樣改變、管腔中精子數(shù)目減少，間質(zhì)增生、間質(zhì)血管增多；

5、睪丸和腺垂體均有少量的纖維化表現(xiàn)。各糖尿病組垂體和睪丸存在強(qiáng)于正常組的IgA、IgG、和IgM的沉積，藥物干預(yù)組均弱于糖尿病未治療組(P<0.05)，小劑量吡格列酮加胰島素組和環(huán)孢素A加胰島素組免疫球蛋白沉積最少，大劑量吡格列酮組免疫球蛋白沉積少于胰島素組(P<0.05)。 結(jié)論：STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠垂體和睪丸存在病理改變及免疫球蛋白的沉積，故推斷16周糖尿病大鼠出現(xiàn)了垂體和睪丸的損傷，免疫反應(yīng)參與了這一損傷過(guò)程，吡格列酮能減

6、少上述器官免疫球蛋白的沉積量，較單純胰島素治療組強(qiáng)，提示吡格列酮具有不依賴血糖水平的免疫抑制作用，且實(shí)驗(yàn)所用劑量對(duì)肝腎功能無(wú)不良影響。 第二部分：STZ誘導(dǎo)的糖尿病大鼠睪丸、垂體病變中TNF-α、IL-1β、FAS、FASL的表達(dá)及吡格列酮對(duì)其表達(dá)的影響 目的：前一階段的研究發(fā)現(xiàn)，糖尿病大鼠的垂體和睪丸免疫球蛋白IgA、IgG、和IgM的的沉積較正常組強(qiáng)，提示免疫損傷在糖尿病垂體、睪丸病變中起作用，而免疫反應(yīng)與炎癥之間有

7、密切的聯(lián)系，免疫系統(tǒng)的激活是二者共同的特征。因此，本試驗(yàn)通過(guò)了解糖尿病睪丸、垂體TNF-α、IL-1β、FAS、FASL的表達(dá)情況進(jìn)一步研究炎癥反應(yīng)在相應(yīng)器官病變中所起的作用及吡格列酮能否減輕炎癥因子的表達(dá)，減少凋亡，具有抗炎作用。 方法：實(shí)驗(yàn)動(dòng)物和分組同上。采用免疫組化的方法對(duì)DM大鼠垂體TNF-α、IL-1β、睪丸TNF-α、FAS、FASL的表達(dá)進(jìn)行定位檢測(cè)，通過(guò)Image-ProPlus5.1及SPSS16.0軟件比較各

8、組指標(biāo)表達(dá)的強(qiáng)弱。 結(jié)果：糖尿病大鼠睪丸TNF-α、FAS、FASL的表達(dá)均強(qiáng)于正常組(P<0.05)，但均較糖尿病未治療組弱(P<0.05)，小劑量吡格列酮加胰島素組和環(huán)孢素A加胰島素組最弱，大劑量吡格列酮組較胰島素組弱(P<0.05)。糖尿病大鼠垂體TNF-α、IL-1β表達(dá)均強(qiáng)于正常組(P<0.05)，但治療組均較糖尿病未治療組弱(P<0.05)，小劑量吡格列酮加胰島素組和環(huán)孢素A加胰島素組最弱，大劑量吡格列酮組較胰島素組