轉(zhuǎn)錄因子Foxl2在小鼠面部和卵巢發(fā)育中的功能研究及其基因表達(dá)長(zhǎng)距離調(diào)控元件初探.pdf

1、瞼裂狹小綜合癥是一種常染色體遺傳病。病人主要表現(xiàn)瞼裂狹小、上瞼下垂、到轉(zhuǎn)型內(nèi)眥贅皮、內(nèi)眥間距過大等眼瞼發(fā)育缺陷，部分女性病人還伴隨卵巢早衰和不育。轉(zhuǎn)錄因子FOXL2突變是造成瞼裂狹小綜合癥的主要原因，這些FOXL2突變包括基因內(nèi)突變和染色體易位、基因組缺失等基因外突變。大量研究顯示，F(xiàn)OXL2的表達(dá)受到遠(yuǎn)距離調(diào)控元件的控制。
　　在本實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行小鼠piggyBac(PB)轉(zhuǎn)座子插入誘變過程中，我們發(fā)現(xiàn)了一個(gè)突變品系B61aR14。

2、該品系純合突變小鼠呈現(xiàn)面部發(fā)育缺陷，主要包括瞼裂狹小和上頜骨發(fā)育不良。回復(fù)突變實(shí)驗(yàn)確認(rèn)這些缺陷是由PB插入而不是背景突變?cè)斐?。該品系PB插入位于9號(hào)染色體非編碼RNAAK087804內(nèi)含子中的一個(gè)TTAA位點(diǎn)上。反轉(zhuǎn)錄PCR發(fā)現(xiàn)AK087804在卵巢而非面部表達(dá)。PB插入破壞了AK087804的表達(dá)，但轉(zhuǎn)基因表達(dá)AK087804不能拯救純合小鼠面部發(fā)育缺陷。因此，純合小鼠面部發(fā)育缺陷與AK087804無關(guān)。距離PB插入位點(diǎn)約160kb的

3、轉(zhuǎn)錄因子Foxl2在胚胎面部表達(dá)，并且在突變體中表達(dá)水平下降。PB插入部分破壞了Foxl2在胚胎面部腮弓區(qū)域的表達(dá)分布，并伴隨Foxl2下游基因Osr2的表達(dá)下降。Foxl2在突變小鼠卵巢中的表達(dá)水平也降低。純合雌鼠卵巢功能下降，生育能力降低。純合突變小鼠的上述表型和基因表達(dá)異常與BPES病人的狀況類似，可望作為一個(gè)新的BPES小鼠模型。
　　我們猜測(cè)PB插入影響了遠(yuǎn)距離調(diào)控元件從而導(dǎo)致Foxl2表達(dá)下調(diào)。我們根據(jù)人-小鼠序列比對(duì)