Wnt-β-catenin信號通路調(diào)控TRPC6參與調(diào)節(jié)高糖引起的足細胞損傷.pdf

1、糖尿病腎?。―N）是一種重要的糖尿病并發(fā)癥，它已經(jīng)成為一個社會性的公共健康問題。糖尿病腎病同時也是終末期腎病(ESRD)的常見誘因。這些年來，在中國由DN導(dǎo)致的終末期腎功能衰竭已越來越常見。人們已知，來自腎小球濾過屏障的損傷是蛋白尿發(fā)生的重要原因。近年來，越來越多的研究表明，足細胞的損傷在DN發(fā)生和發(fā)展的過程中發(fā)揮著重要的作用，這也使得對足細胞的研究已成為近年研究的熱點。已有研究發(fā)現(xiàn)，在DN的早期階段腎小球上有明顯的足細胞脫落現(xiàn)象，這通

2、常被認(rèn)為會引起腎小球蛋白尿以及一系列的腎小球損傷。然而，其潛在的相關(guān)分子機制仍然了解的很少。
　　 Wnt/β-catenin(β-連環(huán)蛋白)信號通路作為一條重要的信號途徑，它在調(diào)節(jié)細胞形態(tài)與功能分化、細胞癌變、細胞凋亡、免疫應(yīng)答以及機體胚胎發(fā)育、腫瘤發(fā)生等病理生理過程中發(fā)揮重要作用。同時，Wnt/β-catenin信號通路也參與腎臟中腎單位的發(fā)育過程，該信號通路發(fā)生異常，通常導(dǎo)致腎腫瘤、多囊腎及ESRD等疾病。然而該通路具體的

3、分子機制仍需要深入的研究。
　　 TRPC6蛋白是近些年通過大量研究才發(fā)現(xiàn)并鑒定出來的一個能夠引起家族性局灶節(jié)段性腎小球硬化(FSGS)的基因，TRPC6基因所編碼的蛋白是一種非選擇性瞬時受體電位陽離子通道蛋白(TRPC6)，它屬于瞬時受體電位(TRP)超家族中的非選擇性陽離子通道成員之一。眾多研究已經(jīng)確定TRPC6的突變能夠?qū)е录易逍跃衷罟?jié)段性腎小球硬化。
　　 目前，關(guān)于Wnt/β-catenin信號途徑與TRPC6

4、的關(guān)系研究仍空白。已有研究顯示，Wnt/β-catenin信號能下調(diào)Nephrin引起足細胞損傷。同時，有研究顯示TRPC6蛋白與Nephrin存在互作，Nephrin突變后TRPC6表達上調(diào)，進而導(dǎo)致足細胞損傷和蛋白尿。綜合已有研究為Wnt/β-catenin信號途徑與TRPC6在DN過程中的關(guān)聯(lián)提供了潛在證據(jù)。
　　 本研究以分化成熟（兩周）的小鼠永生足細胞系為對象，運用MTT、Flowcytometer、RT-PCR和We

5、stern Blot等實驗技術(shù)。研究高糖損傷足細胞的具體分子機制，探討Wnt/β-catenin信號途徑經(jīng)TRPC6影響足細胞損傷的機制，從而為與DN有關(guān)的腎臟系統(tǒng)疾病的治療提供有價值的實驗資料。
　　 本研究得出以下四個結(jié)果:
　　 1、高糖能夠引起足細胞時間依賴性的ROS增高、凋亡和存活率降低，說明高糖引起足細胞的一系列損傷具有相關(guān)的胞內(nèi)信號機制參與。
　　 2、高糖能夠引起足細胞時間依賴性的Wnt/β-ca

6、tenin信號通路激活和TRPC6表達。說明Wnt/β-catenin信號和TRPC6參與了高糖引起的足細胞損傷。
　　 3、阻斷Wnt信號通路之后TRPC6表達下調(diào)，說明Wnt/β-catenin信號調(diào)節(jié)TRPC6的表達。
　　 4、阻斷Wnt信號通路之后，高糖誘導(dǎo)的足細胞的一系列損傷均減輕，說明Wnt/TRPC6信號對足細胞損傷的貢獻明顯。
　　 結(jié)論:Wnt/β-catenin信號通路通過調(diào)控TRPC6參與