BAFF受體TACI融合蛋白的表達(dá)純化與功能研究.pdf

1、B細(xì)胞活化因子(B cell activating factor,BAFF)屬于腫瘤壞死因子超家族的一員。它是外周B細(xì)胞存活的重要因子。在動(dòng)物模型中,BAFF的過表達(dá)會(huì)導(dǎo)致自身免疫病樣癥狀的發(fā)生。研究發(fā)現(xiàn),在不同類型的自身免疫性疾病患者的血清中,BAFF的含量是明顯升高的。近期研究還發(fā)現(xiàn)BAFF還與部分腫瘤疾病的發(fā)生有關(guān)。因此,BAFF的拮抗劑可能成為治療自身免疫疾病和某些腫瘤的新型藥物。
　　 由于BAFF和受體TACI具有高

2、親和力,可特異性識(shí)別BAFF并與之結(jié)合,因此體外構(gòu)建表達(dá)的TACI可中和體內(nèi)過表達(dá)的BAFF,抑制B細(xì)胞的增殖和活化,緩解和治療與BAFF相關(guān)的自身免疫病和B細(xì)胞腫瘤。本課題的研究為開發(fā)BAFF拮抗劑治療BAFF相關(guān)疾病提供了實(shí)驗(yàn)基礎(chǔ)。
　　 本課題研究方法:對(duì)BAFF受體TACI融合蛋白原核表達(dá)與純化,在體外研究TACI對(duì)B系淋巴瘤細(xì)胞增殖的影響,并初步分析了TACI抑制腫瘤細(xì)胞系增殖的機(jī)理。
　　 主要研究結(jié)果:

3、r>　　 (一)TACI融合蛋白原核表達(dá)純化:本實(shí)驗(yàn)室已將釣取的TACI基因片段連接到原核表達(dá)載體pET-32a上。將重組正確的質(zhì)粒轉(zhuǎn)化大腸桿菌Rosetta,獲得TACI表達(dá)工程菌。經(jīng)IPTG誘導(dǎo),融合蛋白利用鎳金屬螯合瓊脂糖凝膠親和層析柱純化。
　　 (二)TACI抑制B系淋巴瘤細(xì)胞系細(xì)胞的增殖:某些B系淋巴瘤細(xì)胞系表達(dá)BAFF及其受體,并且通過自分泌BAFF來促進(jìn)腫瘤細(xì)胞的增殖?？扇苄訲ACI蛋白能夠通過特異性阻斷BAF