殺配子染色體的表觀遺傳學(xué)研究.pdf

1、本研究以小麥為材料，分別是：中國(guó)春(CS)、中國(guó)春-2C2C殺配子雙體附加系(CS-2C2C)、、農(nóng)林26(NL26)、農(nóng)林26-3C3C殺配子雙體附加系(NL26-3C3C)。以不同濃度(10μmol/L，50μmol/L，100μmol/L)的5-氮胞苷(5-AC)進(jìn)行去甲基化處理，探究DNA甲基化在殺配子作用機(jī)制中的作用。從以下3方面入手：(1)細(xì)胞學(xué)畸變率統(tǒng)計(jì)(2)HPLC法檢測(cè)殺配子染色體的甲基化水平(3)MSAP法檢測(cè)殺配子

2、染色體的甲基化水平。主要研究結(jié)果如下：
　　1.小麥甲基化調(diào)控染色體畸變的研究：
　　殺配子雙體附加系小麥的根尖在經(jīng)過(guò)5-AC處理后出現(xiàn)了染色體斷裂、微核、染色體橋、落后染色體等畸變形式。而CS、NL26這兩種不含Gc染色體的小麥則不產(chǎn)生以上畸變形式。
　　2. HPLC法檢測(cè)小麥甲基化水平
　　通過(guò)HPLC技術(shù)檢測(cè)殺配子雙體附加系的基因組DNA甲基化水平均高于普通小麥，所有小麥經(jīng)過(guò)去甲基化處理后，基因組DNA甲

3、基化水平均呈下降趨勢(shì)。
　　3. MSAP法檢測(cè)小麥甲基化水平
　　通過(guò)MSAP技術(shù)檢測(cè)殺配子雙體附加系CCGG位點(diǎn)甲基化水平均高于普通小麥，所有小麥經(jīng)過(guò)5-AC處理后，DNA甲基化水平呈下降趨勢(shì)，CCGG位點(diǎn)上發(fā)生了明顯的甲基化模式變異。
　　4. DNA甲基化在殺配子機(jī)制中的作用
　　殺配子機(jī)制中的兩個(gè)功能分別是斷裂誘導(dǎo)功能和斷裂抑制功能。以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明DNA甲基化在殺配子機(jī)制中起到斷裂抑制功能。去甲基化處