改性PLGA-Ⅰ型膠原復(fù)合支架與軟骨細(xì)胞相容性的研究.pdf

1、目的：通過利用多聚賴氨酸(PLL)對(duì)聚乳酸—羥基乙酸(PLGA)改性后與I型膠原復(fù)合構(gòu)成新型生物支架，探討其親水性以及在體外與軟骨細(xì)胞的相容性，為組織工程材料改性的研究提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法：利用多聚賴氨酸(PLL)對(duì)聚乳酸一羥基乙酸(PLGA)改性后與I型膠復(fù)合構(gòu)成改性復(fù)合生物支架，在倒置顯微鏡下觀察支架的大體結(jié)構(gòu)。將改性復(fù)合生物支架(實(shí)驗(yàn)組，n=5)與PLGA支架(對(duì)照組，n=5)分別浸泡在雙蒸水中，間隔0.5、1、2、4、8

2、、12、24h在電子天平上稱量支架的質(zhì)量，計(jì)算出支架單位體積的吸水量，以此代表支架的親水性。用酶消化法培養(yǎng)兔耳軟骨細(xì)胞并傳代，倒置顯微鏡觀察細(xì)胞的形態(tài)。在兩種支架上接種軟骨細(xì)胞并培養(yǎng)，倒置顯微鏡下觀察細(xì)胞在支架上的形態(tài)和生長(zhǎng)情況，采用細(xì)胞記數(shù)法計(jì)算細(xì)胞接種24h后支架對(duì)細(xì)胞的吸附率：以及采用細(xì)胞增殖法(MTT比色試驗(yàn))分別于1、2、4、6d測(cè)細(xì)胞OD值，繪制細(xì)胞生長(zhǎng)曲線。 結(jié)果：兩種支架浸入雙蒸水后，于0.5、1、2、4、8、1

3、2、24h測(cè)量支架的吸水率，改性復(fù)合支架的吸水率(X±s)分別為3.7683±0.1950、3.8917±0.1665、4.003±0.1504、 4.110±0.1588、 4.2267±0.1102、 4.3167±0.0577、4.4533±0.1328，PLGA支架的吸水率分別為1.3641±0.3722、1.3813±0.3735、 1.3996±0.3731、 1.4258±0.3799、 1.4533±0.3927、1.4

4、800±0.3816、1.5033±0.3758，兩種支架的吸水率在相同時(shí)間點(diǎn)比較有顯著統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.01)。軟骨細(xì)胞接種后，細(xì)胞可以較好粘附于支架上，實(shí)驗(yàn)組吸附的細(xì)胞量比對(duì)照組多、形態(tài)好。細(xì)胞在支架上接種24h后，計(jì)算支架對(duì)細(xì)胞的吸附率(X±S)，實(shí)驗(yàn)組為0.9080±0.0192，對(duì)照組為0.7332±0.0475，兩組比較差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)。軟骨細(xì)胞接種后1、2、4、6d用MTT比色試驗(yàn)測(cè)細(xì)胞OD值(X±S)，

5、實(shí)驗(yàn)組分別為0.3856±0.0563、0.．4687±0.0689、0.6148±0.0892、1.6128±0.1128，對(duì)照組分別為0.1945±0.0324、0.2866±0.0453、0.4625±0.0657、0.9683±0.1056。兩組比較在相同時(shí)間點(diǎn)差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P(0.05)。 結(jié)論：經(jīng)PLL改性的聚乳酸—羥基乙酸(PLGA)與I型膠原復(fù)合構(gòu)成的改性復(fù)合支架比聚乳酸一羥基乙酸(PLGA)支架具有更好的親