Smac在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549凋亡中的作用探討.pdf

1、南方醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文Smac在非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549凋亡中的作用探討姓名：成先東申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：呼吸病學(xué)指導(dǎo)教師：蔡紹曦20080526中文摘要在肺癌中的作用卻鮮有報(bào)道，本研究旨在探討Smac在肺癌凋亡中可能的作用機(jī)制。方法一、不同濃度順鉑對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞內(nèi)SmacmRNA及蛋白表達(dá)的影響。1、不同濃度順鉑刺激NSCLCA549細(xì)胞。2、MTT法檢測(cè)細(xì)胞增殖抑制率。3、AnnexinVFITC／PI雙染經(jīng)

2、流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。4、半定量RTPCR技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)SmacmRNA的表達(dá)。5、Westernblot檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)Smac蛋白表達(dá)水平。二、轉(zhuǎn)染Smac對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549化療敏感性的影響。1、利用脂質(zhì)體介導(dǎo)將Smac基因轉(zhuǎn)入A549細(xì)胞。2、Westemblot檢測(cè)轉(zhuǎn)染后細(xì)胞內(nèi)Smac蛋白表達(dá)水平。3、AnnexinVFITC／PI雙染經(jīng)流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡率。三、統(tǒng)計(jì)學(xué)分析所有原始數(shù)據(jù)采用SPSS100軟件的OneW

3、ayANOVA(LSD／S—NK或DunnettT3)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。P005為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果一、不同濃度順鉑對(duì)tBd細(xì)胞肺癌細(xì)胞株A549細(xì)胞內(nèi)SmacmRNA及蛋白表達(dá)的影響。1、細(xì)胞增殖的測(cè)定：不同濃度順鉑(0、25、5、10gg／m1)作用24小時(shí)后，細(xì)胞增殖抑制率分別為0、1145113％、2178423％、4835291％，各組間比較有顯著差異(P005)。2、細(xì)胞凋亡率的測(cè)定：不同濃度順鉑(0、25、5、10pg／