肌聯(lián)素對豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化及脂肪酸利用的調(diào)控研究.pdf

1、本研究通過分離培養(yǎng)豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞，利用骨骼肌細(xì)胞和肌內(nèi)脂肪細(xì)胞間接共培養(yǎng)、重組肌聯(lián)素處理肌內(nèi)脂肪細(xì)胞等技術(shù)手段，研究肌肉細(xì)胞對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化，肌聯(lián)素對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化、脂肪細(xì)胞中脂肪酸攝取、轉(zhuǎn)運(yùn)和利用的影響。試驗(yàn)獲得以下結(jié)果:
　　1.為了研究豬骨骼肌細(xì)胞對肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞分化的影響，利用豬骨骼肌衛(wèi)星細(xì)胞和肌內(nèi)前體脂肪細(xì)胞共培養(yǎng)，分別誘導(dǎo)分化，檢測肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化水平、脂肪細(xì)胞分化標(biāo)志基因的表達(dá)以及脂代謝關(guān)鍵

2、酶的表達(dá)。結(jié)果表明:與肌內(nèi)脂肪細(xì)胞單獨(dú)培養(yǎng)相比，共培養(yǎng)體系中1）肌內(nèi)脂肪細(xì)胞脂滴數(shù)量和脂滴面積顯著減少(P＜0.05);2)肌內(nèi)脂肪細(xì)胞增殖分化標(biāo)志基因PPARγ和C/EBPα的表達(dá)量極顯著下降(P＜0.01);3）肌內(nèi)脂肪細(xì)胞ACC、FAS的表達(dá)水平極顯著下降（P＜0.01）;4）骨骼肌細(xì)胞內(nèi)肌聯(lián)素的基因表達(dá)水平隨時(shí)間而極顯著地增加。
　　2.為了研究重組肌聯(lián)素對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞利用外源游離脂肪酸的調(diào)控作用，試驗(yàn)采用重組肌聯(lián)素和脂肪

3、酸單獨(dú)或共同處理豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞，研究肌聯(lián)素對肌內(nèi)脂肪細(xì)胞分化、肌內(nèi)脂肪細(xì)胞攝入外周游離脂肪酸的能力、脂質(zhì)合成與分解代謝以及脂肪細(xì)胞線粒體脂肪酸氧化的影響，檢測肌內(nèi)脂肪細(xì)胞培養(yǎng)基中游離脂肪酸的含量、肌內(nèi)脂肪細(xì)胞脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)基因和蛋白的表達(dá)及其作用的信號通路。結(jié)果表明:1）肌聯(lián)素單獨(dú)作用能極顯著降低肌內(nèi)脂肪細(xì)胞的脂滴數(shù)量和脂滴面積(P＜0.01)，并極顯著地促進(jìn)對游離脂肪酸的吸收(P＜0.01);2)肌聯(lián)素單獨(dú)處理或與棕櫚酸共同處理，能顯

4、著提高肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)因子FATP1、FABP4的表達(dá)水平(P＜0.05);3）肌聯(lián)素單獨(dú)處理或與棕櫚酸共同處理后顯著提高肌內(nèi)脂肪細(xì)胞HSL、LPL的表達(dá)量(P＜0.05);
　　4)肌聯(lián)素通過激活p38MAPK信號通路調(diào)節(jié)脂肪酸轉(zhuǎn)運(yùn)和脂代謝。
　　3.為了研究重組肌聯(lián)素對豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞中脂肪酸氧化的影響，試驗(yàn)采用重組肌聯(lián)素處理豬肌內(nèi)脂肪細(xì)胞，檢測線粒體中與脂肪酸氧化相關(guān)的標(biāo)志因子和蛋白的表達(dá)。結(jié)果表明:1）肌聯(lián)