寧夏地區(qū)多重耐藥銅綠假單胞菌的臨床耐藥分布及耐藥研究.pdf

1、目的：
　　研究銅綠假單胞菌的臨床分布和抗菌藥物的耐藥性，從分子水平探討其產(chǎn)生多重耐藥的可能機(jī)制和感染的同源性，從而為有效地預(yù)防和控制多重耐藥銅綠假單胞菌感染提供科學(xué)的參考依據(jù)。
　　方法：
　　1.收集并保存寧夏醫(yī)科大學(xué)附屬醫(yī)院自2011年9月至2012年9月期間臨床分離的非重復(fù)PA菌株285株，采用法國(guó)梅里埃公司全自動(dòng)微生物分析儀（VITEK2 COMPACT）鑒定細(xì)菌；采用K-B法檢測(cè)PA臨床分離株對(duì)14種常用抗

2、生素的藥物敏感試驗(yàn)，應(yīng)用WHONET5.6軟件對(duì)上述藥物敏感結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析，篩選出多重耐藥銅綠假單胞菌。
　　2.將篩選出的124株MDRP菌株通過外排泵抑制劑利血平對(duì)羧芐西林、紅霉素、亞胺培南及慶大霉素的瓊脂稀釋法抑制試驗(yàn)分別檢測(cè)銅綠假單胞菌的MexAB-OprM、MexCD-OprJ、MexEF-OprN、MexXY-OprM四種外排泵的表型，同時(shí)檢測(cè)加入利血平后四種藥物對(duì)銅綠假單胞菌MIC值的變化；應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)（PCR

3、）技術(shù)檢測(cè)外排泵基因。
　　3.將篩選出的124株MDRP菌株，通過PCR檢測(cè)整合酶基因，將IntⅠ檢測(cè)陽性菌株繼續(xù)采用PCR方法擴(kuò)增可變區(qū)；采用PCR-RFLP分析并確定菌株可變區(qū)類型。
　　4.應(yīng)用脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）技術(shù)對(duì)多重耐藥銅綠假單胞菌進(jìn)行同源性分析。
　　結(jié)果：
　　1.2011年9月至2012年9月我院共分離出285株銅綠假單胞菌，標(biāo)本的來源主要是痰液（65.5％），科室的分布主要集中在IC

4、U（34.7%）,耐藥結(jié)果顯示：臨床分離的銅綠假單胞菌對(duì)多粘菌素B敏感，對(duì)亞胺培南、頭孢他啶等耐藥率低，在臨床治療中可以選擇聯(lián)合用藥；篩選出的124株MDRP亦主要來自痰液（62.9%），主要分布在ICU(22.6%)。
　　2.外排泵表型陽性結(jié)果為：MexAB-OprM74株、MexXY-OprM28株、MexEF-OprN12株和MexCD-OprJ10株；124株MDRP菌株中74株MexAB-OprM外排泵表型陽性。

5、>　　3.檢測(cè)124株MDRP其中Ⅰ類整合子陽性菌株有87株，未檢測(cè)出Ⅱ類整合子；87株IntⅠ基因陽性的菌株中有53株有效的擴(kuò)增出Ⅰ類整合子可變區(qū)，通過測(cè)序發(fā)現(xiàn)6種形式的耐藥基因盒。
　　4.對(duì)124株MDRP進(jìn)行脈沖場(chǎng)凝膠電泳（PFGE）分析得到8個(gè)基因型，其中主要的有5個(gè)基因型。
　　結(jié)論：
　　1.在臨床常用抗生素中，銅綠假單胞菌臨床分離株對(duì)多粘菌素B最敏感，對(duì)復(fù)方新諾明的耐藥率最高。標(biāo)本來源主要是痰液，PA主