新型生物納米復(fù)合材料促進(jìn)周圍神經(jīng)再生研究.pdf

1、目的:
　　自體神經(jīng)移植替代物——人工神經(jīng)導(dǎo)管因其制作規(guī)格的多樣性和批量生產(chǎn)的可行性等優(yōu)勢(shì),在周圍神經(jīng)外科領(lǐng)域得到了廣泛應(yīng)用。如何從制作材料和制作方法上改進(jìn)人工神經(jīng)導(dǎo)管的設(shè)計(jì),以最大程度模擬自體神經(jīng)的結(jié)構(gòu)和組分,即是本論文的著眼點(diǎn)所在。
　　材料和方法：
　　1.采用靜電紡絲工藝制作膠原/PCL纖維支架材料(薄膜和導(dǎo)管),通過纖維形態(tài)觀察、親水性測(cè)試、力學(xué)測(cè)試、體外降解測(cè)試等對(duì)其進(jìn)行表征;
　　2.采用復(fù)合膠原酶

2、消化差別分離法體外培養(yǎng)純化大鼠雪旺細(xì)胞,將純化后的雪旺細(xì)胞接種在膠原/PCL紡絲材料表面,觀察細(xì)胞與材料復(fù)合后黏附及增殖情況;
　　3.建立大鼠坐骨神經(jīng)缺損實(shí)驗(yàn)動(dòng)物模型,評(píng)價(jià)紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導(dǎo)管修復(fù)大鼠gmm坐骨神經(jīng)缺損的療效。綜合采用電生理學(xué)和組織形態(tài)分析學(xué)方法,從神經(jīng)到肌肉,從宏觀觀察到微觀形態(tài),從定性判斷到定量分析,評(píng)價(jià)軸突再生和肌肉神經(jīng)再支配的效果;
　　4.在上述復(fù)合材料基礎(chǔ)上加入經(jīng)羧基化修飾的多壁碳納米管

3、(CNTs),制作CNTs增強(qiáng)型紡絲膠原/PCL纖維支架材料(CNT-CoI/PCL),評(píng)價(jià)CNTs對(duì)材料力學(xué)及降解性能的影響,并對(duì)其進(jìn)行初步的體內(nèi)生物相容性探索。
　　結(jié)果:
　　1.紡絲膠原/PCL復(fù)合材料薄膜和導(dǎo)管由亞微米級(jí)纖維構(gòu)成,與細(xì)胞外基質(zhì)結(jié)構(gòu)相似,具有良好的親水性和彈性,降解性能符合神經(jīng)導(dǎo)管要求;
　　2.雪旺細(xì)胞在膠原/PCL紡絲材料表面伸展良好,突起沿纖維走向伸長(zhǎng),材料對(duì)細(xì)胞的增殖無(wú)顯著性影響;

4、>　　3.紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導(dǎo)管取得了與自體神經(jīng)相似的神經(jīng)缺損修復(fù)效果,且該紡絲導(dǎo)管的降解速率恰好與神經(jīng)再生速率相匹配;
　　4.經(jīng)羧基化修飾的多壁CNTs可均勻分散于膠原/PCL溶液中,并可紡絲形成纖維,材料的親水性較膠原/PCL材料更好,可承受的拉伸力更大,但降解要慢。在促進(jìn)神經(jīng)纖維再生通過缺損和防止肌肉失神經(jīng)萎縮方面,CNT-Col/PCL復(fù)合材料基本起到了與自體神經(jīng)移植相似的效果,且在動(dòng)物體內(nèi)沒有引起機(jī)體的排斥反應(yīng)或

5、嚴(yán)重的慢性炎性反應(yīng)。
　　結(jié)論:
　　1.靜電紡絲工藝可用于制作亞微米級(jí)/納米級(jí)纖維構(gòu)成的膠原/PCL支架材料和CNTs增強(qiáng)型膠原/PCL支架材料。
　　2.紡絲支架材料支持雪旺細(xì)胞的黏附生長(zhǎng)及增殖。
　　3.紡絲膠原/PCL多孔神經(jīng)導(dǎo)管在促進(jìn)大鼠坐骨神經(jīng)再生方面表現(xiàn)出色,在促進(jìn)更多軸突長(zhǎng)入遠(yuǎn)側(cè)神經(jīng)斷端的同時(shí)可實(shí)現(xiàn)有效降解。
　　4.紡絲CNT-Col/PCL導(dǎo)管材料可有效促進(jìn)再生神經(jīng)通過大鼠坐骨神經(jīng)8mm