西瓜未授粉子房離體培養(yǎng)技術(shù)的研究.pdf

1、西瓜在中國(guó)栽培面積十分廣泛，需求量大。但西瓜的遺傳基礎(chǔ)狹窄，常規(guī)育種的周期長(zhǎng)、工作量大、遺傳性狀的不穩(wěn)定和不易獲得目標(biāo)性狀等因素在很大程度上限制了西瓜的育種進(jìn)程。西瓜未授粉子房離體培養(yǎng)途徑可以產(chǎn)生單倍體或雙單倍體植株，進(jìn)而獲得純合的自交系，縮短育種周期。本試驗(yàn)以4個(gè)雜種一代西瓜品種為供試材料，利用材料的未授粉子房為外植體，主要研究了暗培時(shí)間、次氯酸鈉溶液濃度及消毒時(shí)間、不同基本培養(yǎng)基與TDZ、NAA、BA和KT不同濃度組合對(duì)胚珠膨大率的

2、影響，同時(shí)對(duì)影響西瓜未授粉子房離體培養(yǎng)誘導(dǎo)再生植株的主要因素如基因型和誘導(dǎo)培養(yǎng)基做了試驗(yàn)探索，并對(duì)得到的再生植株進(jìn)行了倍性鑒定。本研究的目的是進(jìn)一步完善和優(yōu)化西瓜未授粉子房離體培養(yǎng)技術(shù)，使該項(xiàng)技術(shù)逐漸成熟進(jìn)而應(yīng)用到西瓜的育種工作中。試驗(yàn)主要研究結(jié)果如下:
　　1次氯酸鈉溶液濃度和消毒時(shí)間對(duì)胚珠的誘導(dǎo)膨大率產(chǎn)生一定的影響，試驗(yàn)結(jié)果表明10％的次氯酸鈉溶液消毒10min對(duì)誘導(dǎo)胚珠膨大的效果最好。
　　2暗培時(shí)間的長(zhǎng)短影響著胚珠膨

3、大的誘導(dǎo)效果，雖然暗培7d和14d對(duì)胚珠的膨大率沒有顯著差異，但都顯著高于沒有進(jìn)行暗培處理的胚珠膨大率，因此可以適當(dāng)增加暗培時(shí)間來提高胚珠的誘導(dǎo)率。
　　3基本培養(yǎng)基中營(yíng)養(yǎng)成分的變動(dòng)也會(huì)對(duì)胚珠的誘導(dǎo)率產(chǎn)生影響，M2基本培養(yǎng)基本中的有機(jī)物質(zhì)含量較高，本試驗(yàn)的研究發(fā)現(xiàn)M2培養(yǎng)基上的胚珠誘導(dǎo)效果最好，且再生植株也是在M2培養(yǎng)基上獲得的。
　　4采用正交設(shè)計(jì)的試驗(yàn)方法對(duì)不同種類、濃度的激素組合進(jìn)行了篩選，表明激素對(duì)西瓜未授粉子房離體

4、培養(yǎng)是必要的，當(dāng)TDZ濃度為0.04-0.08mg/L，NAA濃度為0.5mg/L，BA和KT的濃度都偏低時(shí)，對(duì)誘導(dǎo)胚珠膨大的效果較好;在MS+0.5mg/LNAA+1.0mg/L6-BA+0.5mg/LKT分化培養(yǎng)基上，有利于誘導(dǎo)膨大胚珠分化出胚狀體。
　　5改良后的誘導(dǎo)培養(yǎng)基M2+0.02TDZ+0.5NAA+0.56-BA，誘導(dǎo)分化出了胚狀體，并且得到了完整的再生植株。
　　6西瓜基因型對(duì)未授粉子房離體培養(yǎng)誘導(dǎo)胚狀體具