原子力顯微鏡對(duì)A型流感病毒形態(tài)的研究.pdf

1、流感病毒是具包膜的病毒，A型流感病毒常以流行的形式出現(xiàn)，可造成世界性大流行。歷史上每次流感大流行都給人類健康和社會(huì)經(jīng)濟(jì)帶來(lái)災(zāi)難，究其主要原因是由于表面抗原發(fā)生變異，因此有必要對(duì)病毒表面結(jié)構(gòu)進(jìn)行精細(xì)研究。本文利用原子力顯微鏡對(duì)A型流感病毒形態(tài)進(jìn)行了研究。 第一部分： 目的：利用AFM和TEM觀察A型流感病毒表面形態(tài)，探討．AFM在病毒表面形態(tài)研究中的應(yīng)用。方法：TEM采用磷鎢酸負(fù)染方法，AFM采用輕敲模式在大氣常溫下掃描成

2、像，并對(duì)主要指標(biāo)長(zhǎng)度(直徑)、Ra、Rq等進(jìn)行測(cè)量。結(jié)果：A型流感病毒呈球狀、絲狀等多種形態(tài)。TEM提供了病毒二維圖像，表面可見(jiàn)釘狀突起，AFM則呈現(xiàn)了病毒三維圖像，相位圖可見(jiàn)病毒表面有凹凸不平的特征和邊緣有齒輪狀的突起，同時(shí)獲得表面粗糙度等可以量化指標(biāo)。 第二部分： 目的：用AFM觀察病毒與表面活性劑作用的形態(tài)，通過(guò)對(duì)比不同表面活性劑對(duì)病毒表面結(jié)構(gòu)的破壞效果，篩選出一種有效的表面活性劑及其使用濃度。方法：用AFM觀察病

3、毒與NP-40、EDTA等作用后的形態(tài)。結(jié)果：NP-40各濃度對(duì)病毒表面結(jié)構(gòu)破壞程度不一，病毒隨NP-40濃度增高而逐漸降解：EDTA對(duì)病毒表面的破壞程度不如NP-40明顯，有規(guī)律。 第三部分： 目的：用AFM和TEM觀察完整病毒以及NF-40作用的病毒與不同血清結(jié)合情形，從免疫學(xué)角度判斷NP-40對(duì)病毒表面結(jié)構(gòu)的作用效果，并探索以原子力顯微鏡為工具的A型流感病毒的免疫檢測(cè)方法。方法：用AFM和TEM觀察完整病毒以及NP

4、-40作用的病毒的形態(tài)以及病毒與不同血清結(jié)合后的形態(tài)，并測(cè)量直徑、粗糙度等表征參數(shù)。結(jié)果：通過(guò)AFM獲得了病毒與不同血清結(jié)合后的形貌圖和表征參數(shù)值。AFM顯示血清對(duì)病毒的大小有影響，病毒的直徑明顯增大。而TEM顯示完整病毒與H1N1免疫鼠血清結(jié)合后，出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。0.05％NP-40作用的病毒與H1N1和FN蛋白免疫鼠血清結(jié)合后，均出現(xiàn)凝集現(xiàn)象。比較0.05％NP-40作用的病毒和完整病毒與血清的結(jié)合情況，NP-40對(duì)病毒的表面結(jié)構(gòu)以及