蕎麥花葉總黃酮對2型糖尿病大鼠心肌損傷及PI3K的影響.pdf

1、目的：觀察蕎麥花葉總黃酮對2型糖尿病大鼠心肌損傷的保護作用及可能機制。
　　方法：清潔級雄性 SD大鼠，隨機分為對照組和造模組。對照組普通飼料喂養(yǎng)，其余大鼠喂高糖高脂飼料。16周后，禁食不禁水12h，高糖高脂飼料喂養(yǎng)的大鼠尾靜脈注射鏈脲佐菌素（STZ）12.5mg/kg每隔72h注射一次，連續(xù)三次，建立2型糖尿病大鼠模型。一周后取尾靜脈血測餐后2h血糖，連續(xù)三次血糖在11.1mmol/L以上者作為造模成功指標(biāo)。將造模成功大鼠隨機分

2、為模型組（Model group），二甲雙胍組（0.15 g/kg/d，MET group），蕎麥花葉總黃酮低劑量組（0.10 g/kg/d，L-TFBFL group），蕎麥花葉總黃酮高劑量組（0.20 g/kg/d，H-TFBFL group），每組10只，各給藥組每日灌胃相應(yīng)的藥量，模型與正常對照組灌胃等容量的生理鹽水，連續(xù)給藥6周。給藥期間動態(tài)觀察大鼠一般狀態(tài)；測定給藥0、2、4、6周餐后2h血糖值；給藥結(jié)束后禁食12h，測定糖

3、耐量、血清乳酸脫氫酶和肌酸激酶同工酶的活性；測定大鼠體重及心重指數(shù)；取心尖及左心室組織 HE染色、Masson染色和透射電鏡觀察心肌組織形態(tài)學(xué)的改變；取右心室組織，用免疫組化法和western blot的方法測定心肌組織中PI3K蛋白的表達(dá)。
　　結(jié)果：1與 Control組比較，Model組大鼠表現(xiàn)為多飲、多食、多尿，體重增加（P<0.01），精神萎靡等癥狀；與 Model組比較，各給藥組大鼠上述一般情況有所改善，體重有所降低，

4、但 TFBFL與 Model組比較無統(tǒng)計學(xué)差異（P>0.05）。2糖耐量實驗結(jié)果顯示：Model組各點血糖值均高于 Control組，治療組各點血糖值較 Model組均明顯降低（P<0.01），TFBFL能改善糖耐量且有劑量依賴性。3給藥前造模大鼠各組餐后2h血糖值明顯高于 Control組，模型各組間無差異（P>0.05）；給藥后各藥物治療組大鼠餐后2h血糖值顯著低于 Model組（P<0.01），在4WPBG、6WPBG降低作用較明

5、顯，H-TFBFL組作用更明顯，與MET組相近（P>0.05）。4與Control組相比，Model組大鼠血清肌酸激酶同工酶CK-MB活性明顯升高（P<0.01），與 Model組比較，TFBFL治療組血清 CK-MB活性明顯降低（P<0.01）;各組間血清LDH的活性無顯著性差異（P>0.05）。5與對照組相比，模型組大鼠體重明顯增加（P<0.01），TFBFL組與模型組比較，體重有降低趨勢，但無顯著性差異（P>0.05）；五組大鼠的

6、心重指數(shù)沒有明顯差別（P>0.05）。6心臟組織HE和Masson染色結(jié)果顯示：與Control組比較，Model組大鼠心肌纖維排列紊亂，心肌細(xì)胞明顯腫脹肥大；HE染色顯示，心肌細(xì)胞間成纖維細(xì)胞增生，血管周圍有炎細(xì)胞浸潤，明顯充血；Masson染色顯示，心肌細(xì)胞間膠原纖維沉積；各藥物治療組心肌纖維紊亂有所改善，心肌細(xì)胞腫脹均有所減輕，間質(zhì)成纖維細(xì)胞和膠原纖維減少。7透射電鏡下心肌組織超微結(jié)構(gòu)觀察：與Control組比較，Model組大鼠

7、可見到肌原纖維排列紊亂，心肌細(xì)胞中線粒體數(shù)目增多，排列紊亂、擠壓，且線粒體腫脹變性，有空泡化，嵴斷裂、稀疏；與 Model組比較，各藥物治療組心肌組織結(jié)構(gòu)有明顯改善，H-TFBFL組和二甲雙胍組改善更明顯。8 PI3K檢測結(jié)果：與 Control組相比，Model組 PI3K蛋白表達(dá)明顯降低（P<0.01），而與 Model組比較，各藥物治療組的PI3K蛋白表達(dá)均顯著升高（P<0.01），H-TFBFL組PI3K蛋白表達(dá)升高更顯著（P<