妊娠糖尿病大鼠胚胎肝臟的差異蛋白質(zhì)組學(xué)研究.pdf

1、目的:
　　妊娠糖尿病(gestational diabetes mellitus，GDM)是指妊娠期出現(xiàn)的糖尿病或者糖耐量異常。隨著病程的進(jìn)一步發(fā)展可發(fā)生妊娠期高血壓疾病等合并癥對母嬰健康的危害非常嚴(yán)重，及時(shí)發(fā)現(xiàn)和預(yù)防治療可以減少圍生兒患病率、致畸率及病死率。本研究通過建立妊娠糖尿病大鼠模型，探討建立模型的最佳劑量;從表達(dá)生命特征、動態(tài)描述基因調(diào)節(jié)的蛋白質(zhì)入手，對胚胎肝臟進(jìn)行蛋白質(zhì)組學(xué)研究，尋找妊娠糖尿病胚胎肝臟的差異蛋白質(zhì)，從

2、蛋白質(zhì)水平上探討妊娠糖尿病對胚胎肝臟及其他器官發(fā)育的影響。
　　方法:
　　1.SD大鼠按雄雌比例1∶2合籠過夜，鏡檢見精子者計(jì)為妊娠0d(E0.5)，標(biāo)記孕鼠并計(jì)算孕期，將55只（假孕大鼠不計(jì)入）孕鼠隨機(jī)分成3組。孕期第6天(E6.5)，實(shí)驗(yàn)組分別用45mg/kg(D45)和55mg/kg(D55)的STZ一次性腹腔注射，對照組用等量的枸櫞酸鹽緩沖液代替，處理前禁食12h。觀察大鼠空腹血糖、尿糖、成模率、死亡率及轉(zhuǎn)陰率和母

3、鼠流產(chǎn)、胚胎畸形的情況;
　　2.雙向電泳分離正常對照組和妊娠糖尿病胚胎肝臟的蛋白質(zhì);Image Master2DPlatinum6.0軟件對電泳圖譜進(jìn)行分析，尋找表達(dá)差異蛋白點(diǎn);
　　3.對差異蛋白點(diǎn)進(jìn)行LC-MS/MS質(zhì)譜鑒定;
　　4.生物信息學(xué)分析差異蛋白點(diǎn)的功能，綜合探討妊娠糖尿病對胚胎肝臟發(fā)育的影響。
　　結(jié)果:
　　1.成功建立妊娠糖尿病模型，大鼠出現(xiàn)血糖升高、“三多一少”。與對照組相比，實(shí)驗(yàn)

4、組空腹血糖、尿糖均明顯升高;母體流產(chǎn)和胚胎發(fā)育畸形率明顯升高。
　　2.妊娠糖尿病大鼠胚胎肝臟有差異表達(dá)蛋白。在肝臟中鑒定了14個(gè)蛋白，分別與能量代謝、細(xì)胞增殖、內(nèi)質(zhì)網(wǎng)應(yīng)激及氧化相關(guān)。
　　結(jié)論:
　　1.腹腔注射STZ45mg/kg成模率高，死亡率低，轉(zhuǎn)陰率低;同時(shí)母體流產(chǎn)及胚胎畸形情況更符合實(shí)驗(yàn)研究要求。本研究中，STZ45mg/kg是建立妊娠糖尿病大鼠模型的理想劑量。
　　2.在胚胎肝臟中發(fā)現(xiàn)的差異蛋白主要