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文檔簡介
1、目的:
篩選和鑒定骨肉瘤發(fā)病相關(guān)的基因，揭示骨肉瘤發(fā)病的分子機制。
方法:
收集3例手術(shù)切除骨肉瘤新鮮組織標本，及患者正常血清作為對照，提取組織總RNA，經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄及標記，再與Affymetrix基因芯片雜交，采用經(jīng)驗貝葉斯法篩選出骨肉瘤發(fā)病的差異表達基因；經(jīng)對差異表達基因進行Gene ontology注釋并對其分子功能、生物學途徑及信號通路富集分析，從中選擇3個基因；最后用RT-PCR和Western bl
2、ot驗證部分基因的表達。
結(jié)果:
基因芯片篩選到105個骨肉瘤發(fā)病的差異表達基因，其中在骨肉瘤中表達上調(diào)的42個，下調(diào)的63個；骨肉瘤發(fā)病的差異表達基因主要分子功能為蛋白質(zhì)結(jié)合等。分布的生物學途徑為免疫應(yīng)答、補體活化及信號轉(zhuǎn)導等。主要參與的信號通路為免疫應(yīng)答、細胞活力、細胞運動及負調(diào)控細胞凋亡等；RT-PCR和Western blot驗證BAX、HMMR和SHB基因的表達，結(jié)果與芯片結(jié)果相符。
結(jié)論:
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