鴨A-FABP基因和H-FABP基因的克隆、表達及其功能研究.pdf

1、FABPs屬于脂結(jié)合蛋白超家族成員，是一類分子量較小而對脂肪酸有高親和力的蛋白質(zhì)，廣泛地存在于脊椎動物和非脊椎動物的細胞質(zhì)中。FABPs擔當細胞內(nèi)脂肪酸的運輸任務。它們與脂肪酸結(jié)合將其運輸?shù)街舅嵫趸奈恢?、脂肪酸脂化成甘油三酯或磷脂的位置，或者進入細胞核內(nèi)發(fā)揮其可能的調(diào)控功能。因此FABPs對脂類代謝具有重要的調(diào)控作用。本研究以雞、哺乳動物FABP基因序列為基礎，通過比較基因組學和生物信息學等方法克隆鴨的FABP基因；采用RT-PCR

2、方法研究FABP基因的組織表達特性。以昆山麻鴨、櫻桃谷鴨等群體為研究材料，采用測序和PCR-SSCP的方法檢測鴨FABP基因的多態(tài)性，并進行基因多態(tài)位點與生長和體組成性狀的相關(guān)分析。主要研究結(jié)果如下： (1)通過RT-PCR法和比較基因組法克隆了鴨A-FABP基因的部分cDNA序列(5’端、外顯子Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ)和部分基因組序列(內(nèi)含子Ⅰ、Ⅱ、部分Ⅲ)。(GenBank：DQ358123；DQ358124) (2)通過RT-

3、PCR法和比較基因組法克隆了鴨H-FABP基因的部分cDNA序列(部分外顯子Ⅰ、Ⅱ)和部分基因組序列(內(nèi)含子Ⅰ)。 (3)RT-PCR分析表明鴨A-FABP基因在脂肪、卵巢、骨骼肌、脾、小腸、心、腺胃、肝中均有表達，而在間腦、肺和腎中不表達。 (4)RT-PCR分析表明鴨H-FABP基因在心臟、骨骼肌、脂肪、小腸、腺胃、肌胃、肺、間腦、腎中有表達，而肝、脾和卵巢中不表達。 (5)在鴨A-FABP基因的內(nèi)含子Ⅱ中發(fā)

4、現(xiàn)“A-T”、“T-C”、“T-C”和“C-T”4處堿基突變。A-FABP基因多態(tài)性與鴨的皮脂重、皮脂率、腹脂重、腹脂率和肌內(nèi)脂肪含量等性狀顯著相關(guān)或極顯著相關(guān)(P＜0.05或P＜0.01)。在P7位點上，櫻桃谷鴨群體中，BB基因型個體的皮脂率極顯著高于AB基因型個體(P＜0.01)；BB基因型個體的腹脂重、腹脂率、腿肌肌內(nèi)脂肪含量均顯著高于AA和AB基因型個體(P＜0.05)。昆山麻鴨群體中，CC基因型個體的皮脂率極顯著低于BC基因型

5、個體(P＜0.01)，CC基因型的皮脂重顯著低于BC基因型個體(P＜0.05)；BB基因型個體的胸肌肌內(nèi)脂肪含量極顯著低于BC基因型個體(P＜0.01)，并且顯著低于AB和CC基因型個體(P＜0.05)；AB基因型個體的腿肌肌內(nèi)脂肪含量顯著低CC基因型個體(P＜0.05)；CC基因型個體的脂帶寬顯著低于BC基因型個體(P＜0.05)。 (6)在鴨H-FABP基因的內(nèi)含子Ⅰ中發(fā)現(xiàn)了2處多態(tài)位點。在P14位點上，在櫻桃谷鴨檢測群體中