白香蕉葡萄芽變突變體鑒定及四倍體誘導(dǎo)研究.pdf

1、白香蕉為歐美雜交種，為中晚熟品種，適應(yīng)性強(qiáng)，抗寒、抗?jié)瘢共×^強(qiáng)。從一次田間采取材料的過(guò)程中，我們從一個(gè)果農(nóng)的葡萄園中發(fā)現(xiàn)了白香蕉葡萄芽變突變體。芽變后的白香蕉果皮為紫紅色。由于白香蕉在豐產(chǎn)性、抗病、抗?jié)竦确矫姹仍S多其它歐美雜種葡萄(如巨峰、紅富士等)更加顯著，田間管理較其它品種粗放，生產(chǎn)投入更低，加之果皮的紅色芽變，商品性提高，因此白香蕉葡萄的紅色芽變有較高的推廣價(jià)值。本試驗(yàn)擬以白香蕉的紅色芽變突變體(二倍體)為材料，與未芽變的白香

2、蕉材料進(jìn)行形態(tài)學(xué)和分子生物學(xué)方面的比較鑒定，并采用化學(xué)藥物(秋水仙素)對(duì)田間多年生活體材料和綠枝扦插材料進(jìn)行處理，擬進(jìn)一步獲得少核的四倍體葡萄，并為最終獲得無(wú)核三倍體提供親本材料。本論文還研究了該芽變材料的離體快繁體系，對(duì)外植體的消毒、初代培養(yǎng)、叢生芽增殖、生根壯苗培養(yǎng)等組織培養(yǎng)的關(guān)鍵環(huán)節(jié)進(jìn)行了培養(yǎng)基篩選。具體研究結(jié)果如下： (1)白香蕉與芽變突變體的形態(tài)學(xué)特征區(qū)別表現(xiàn)在幼葉顏色上，前者的幼葉顏色為銅銹色，后者為黃白色。說(shuō)明果皮

3、芽變基因可能與控制幼葉顏色基因有關(guān)。 (2)物候期方面，芽變突變體比白香蕉提前13天成熟。紅色芽變能提早成熟可能與芽變突變體糖分積累加快，不溶性的原果膠轉(zhuǎn)變?yōu)榭扇苄缘墓z速度提高有關(guān)。這可以減少成熟期裂果和鳥害的危害。 (3)果實(shí)品質(zhì)方面，兩者可溶性糖的含量、糖酸比、果肉硬度、耐拉力均達(dá)到顯著差異。芽變突變體可溶性糖較原品種提高3.5﹪，糖酸比降低11.3，果肉硬度增加0.1kg/m2，耐拉力提高0.41kg。這表明突變

4、體能提高果實(shí)的商品性能。 (4)從100條ISSR引物中篩選出18條引物，用于白香蕉葡萄及其芽變的分析中。18條引物共擴(kuò)增出104條帶紋。其中，引物823能區(qū)分出對(duì)照及其芽變株，結(jié)果表明ISSR標(biāo)記能有效的應(yīng)用于本材料的芽變鑒定。 (5)在快繁體系建立研究中，用70﹪的乙醇處理外植體20s，再用0.1﹪的升汞浸泡8min成活率達(dá)到68﹪。在不同滅菌方法對(duì)接種效率的研究中，以70﹪的乙醇處理10s，0.1﹪升汞消毒3min

5、，無(wú)菌水沖洗2次后，用CA/AA溶液浸泡3h，再以0.1﹪升汞消毒6min,無(wú)菌水沖洗4次的二次間歇滅菌的方法獲得外植體的無(wú)菌系最好。 (6)適合白香蕉芽變材料初代培養(yǎng)的培養(yǎng)基配方為MS+2mg/L6-BA+0.2mg/LNAA。出芽率達(dá)到83﹪。以MS+1.0mg/L6-BA+0.1mg/LNAA作為白香蕉芽變株系試管苗的增殖培養(yǎng)基為宜。增殖系數(shù)達(dá)到3.1。用MS+0.2mg/L6-BA+1.0mg/LIBA對(duì)叢生芽生長(zhǎng)為幼莖

6、的配方為最佳。生長(zhǎng)為幼莖的百分率達(dá)到75﹪。生根培養(yǎng)基為MS+0.5mg/LIBA，生根率達(dá)到為90﹪，根系質(zhì)量好，并有大量側(cè)根產(chǎn)生，無(wú)愈傷形成。 (7)從成活率和變異可能性機(jī)率較大兩方面考慮，用秋水仙素處理田間活體芽變材料，其濃度以0.2﹪左右，處理時(shí)間在48-72h之間為宜。 (8)在用秋水仙素處理多年生葡萄新梢和綠枝扦插葡萄新梢誘導(dǎo)多倍體時(shí)，通過(guò)對(duì)處理材料根尖和卷須的染色體數(shù)目計(jì)數(shù)，各檢測(cè)到一株加倍的四倍體材料，前