不同來(lái)源甘草的質(zhì)量特征及評(píng)價(jià)研究.pdf

1、甘草為常用的大宗藥材，隨著時(shí)代的發(fā)展及對(duì)其研究的不斷深入，甘草的應(yīng)用領(lǐng)域在不斷地?cái)U(kuò)大，導(dǎo)致甘草的需求量不斷地增加，并遠(yuǎn)遠(yuǎn)超過(guò)其生產(chǎn)量。目前在野生甘草的自然分布區(qū)都開展了人工栽培甘草的生產(chǎn)。所以當(dāng)今藥材市場(chǎng)上同時(shí)存在著栽培與野生甘草，但二者的質(zhì)量究竟有無(wú)差異，是否具有相同的療效，不同種源、不同產(chǎn)地、不同生長(zhǎng)年限的栽培甘草是否具有相同的療效，這些都是栽培甘草應(yīng)用于臨床必須解決的問(wèn)題。本研究采用對(duì)甘草中多類有效成分含量測(cè)定，同時(shí)進(jìn)行HPLC指

2、紋圖譜特征分析研究，結(jié)合部分藥效學(xué)試驗(yàn)結(jié)果，對(duì)當(dāng)今栽培技術(shù)下內(nèi)蒙古杭錦旗、赤峰及吉林白城生產(chǎn)的不同人工栽培甘草及杭錦旗道地野生甘草的質(zhì)量特征進(jìn)行了分析研究及評(píng)價(jià)，取得了如下結(jié)果： 1.對(duì)栽培、野生甘草樣品的HPLC指紋圖譜中的主要指紋峰進(jìn)行了歸屬解析：利用高效液相—質(zhì)譜聯(lián)用方法，共確定12個(gè)化合物；發(fā)現(xiàn)保留時(shí)間在22min以前主要為二氫黃酮苷、查爾酮苷和黃酮苷類；25-35min之間主要為三萜皂苷類成分，35min后主要為香豆素

3、類等成分。 2.產(chǎn)地對(duì)人工栽培甘草藥材質(zhì)量的影響研究發(fā)現(xiàn)：(1)對(duì)藥材中四種有效成分含量都有影響，統(tǒng)計(jì)結(jié)果顯示產(chǎn)地對(duì)甘草酸、多糖有極顯著影響；對(duì)總黃酮、甘草苷影響不顯著。所測(cè)四種成分都以內(nèi)蒙古杭錦旗的含量最高，內(nèi)蒙古赤峰與吉林白城差異不大。(2)產(chǎn)地影響四種有效成分含量的相對(duì)比例。(3)還發(fā)現(xiàn)各種黃酮苷、香豆素類化合物含量的相對(duì)比值也因產(chǎn)地而顯示不同的規(guī)律。吉林白城的樣品中香豆素等化合物相對(duì)含量較高；赤峰樣品中香豆素等成分的比例

4、很低。(4)明確了三個(gè)不同產(chǎn)地栽培甘草的質(zhì)量特征。 3.生長(zhǎng)年限對(duì)人工栽培甘草質(zhì)量的影響研究發(fā)現(xiàn)：(1)生長(zhǎng)年限對(duì)藥材中總黃酮及多糖的含量有顯著的影響。藥材中甘草酸、甘草苷、總黃酮的含量在2～4年內(nèi)基本是隨著生長(zhǎng)年限的延長(zhǎng)不斷增加或基本不變，與年限基本是正相關(guān)；但多糖含量與生長(zhǎng)年限為負(fù)相關(guān)，隨著生長(zhǎng)年限的延長(zhǎng)而降低。內(nèi)蒙古杭錦旗5年生樣品中，發(fā)現(xiàn)各種成分的含量都有所降低。(2)生長(zhǎng)年限對(duì)甘草中甘草酸、甘草苷、總黃酮、多糖含量的相

5、對(duì)比例影響不明顯，但對(duì)總黃酮中黃酮苷類含量的影響較大，它們含量的相對(duì)比值隨生長(zhǎng)年限延長(zhǎng)而增加，即在總成分中所占比例擴(kuò)大；香豆素類成分在總成分中所占比例變化不明顯；異甘草苷(Isoliquiritin)隨著生長(zhǎng)時(shí)間延長(zhǎng)而逐漸下降。 4.種源對(duì)人工栽培甘草質(zhì)量的影響研究發(fā)現(xiàn)：種源對(duì)樣品中三種(類)有效成分含量的影響不大，主要影響黃酮類成分。 5.對(duì)杭錦旗不同野生甘草研究發(fā)現(xiàn)：(1)地上莖為紅色與綠色的野生甘草中四種有效成分的

6、含量及相互之間的比例接近，差異不明顯。HPLC指紋圖譜相似性也很高；(2)甘草根中甘草酸、甘草苷的含量都明顯高于根莖，總黃酮與多糖的差異不顯著；(3)不同等級(jí)藥材中四種有效成分含量與等級(jí)的高低無(wú)關(guān)；(4)普通與特殊結(jié)構(gòu)(只有主根的樣品)甘草相比，甘草酸含量有顯著差異，普通甘草中甘草酸的含量要高于特殊結(jié)構(gòu)的甘草。但甘草苷、總黃酮、多糖沒(méi)有明顯的差異。 6.比較人工栽培與野生甘草質(zhì)量發(fā)現(xiàn)：(1)多數(shù)人工栽培甘草中甘草苷、總黃酮、多糖

7、與野生甘草含量相差不大，甘草酸的含量有明顯的差別；(2)內(nèi)蒙古杭錦旗3～5年生人工栽培甘草中各成分的含量都與野生甘草相近，但甘草苷的相對(duì)含量高；(3)野生甘草中四種有效成分比例相對(duì)穩(wěn)定。但栽培甘草中四種成分比例與產(chǎn)地有關(guān)。 從野生與栽培甘草HPLC指紋圖譜發(fā)現(xiàn)，二者圖譜中多數(shù)指紋峰的峰形、保留時(shí)間基本一致，所含的化學(xué)成分基本一樣；人工栽培與野生甘草保留時(shí)間在35min后的4個(gè)峰有較明顯差別，即野生品的一個(gè)峰在栽培品圖譜中不明顯，

8、而栽培品的三個(gè)色譜峰(包括甘草香豆素、甘草醇、異甘草醇)在野生品中不明顯。因此可以利用這兩組峰來(lái)初步辨別野生和栽培品。 7.不同質(zhì)量特征的野生與兩種栽培甘草保肝降酶藥效學(xué)研究發(fā)現(xiàn)：(1)對(duì)由四氯化碳引起急性肝臟損傷，雖然三個(gè)供試藥材中甘草酸、甘草苷等含量差別較大，但試驗(yàn)結(jié)果沒(méi)有差異。且每種藥材的三個(gè)劑量組保肝降酶的效果也沒(méi)有差異，沒(méi)有明確的量效關(guān)系。(2)不同質(zhì)量甘草藥材抑菌效果不同。從對(duì)試驗(yàn)中數(shù)個(gè)菌種的整體抑菌效果來(lái)看，杭錦旗

9、栽培3年生甘草≥野生綠莖條草＞赤峰栽培3年甘草＞白城栽培4年生甘草。反應(yīng)了抗菌效果與甘草酸、甘草苷二者含量相關(guān)。 8.對(duì)三個(gè)試驗(yàn)地自然條件與甘草酸含量關(guān)系分析表明：較高溫度和較強(qiáng)的日照有利于甘草酸的形成與積累；水分條件與上述溫度作用相反，降水量和空氣濕度與甘草酸的含量呈負(fù)相關(guān)；甘草酸含量還與地理位置土壤條件有關(guān)。對(duì)藥材及其生長(zhǎng)土壤中18元素分析還發(fā)現(xiàn)：藥材中的含量與相應(yīng)土壤中的量成正比關(guān)系。且含量越高，規(guī)律性越強(qiáng)；因產(chǎn)地及環(huán)境不

10、同，四種甘草藥材中各種元素的含量差別較大。 總之，野生與栽培甘草各具特征；從本研究結(jié)果來(lái)看，產(chǎn)地對(duì)甘草質(zhì)量的影響大于生長(zhǎng)年限及種源。適宜產(chǎn)地生產(chǎn)的人工栽培甘草的質(zhì)量可以達(dá)到現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)要求；即使那些生長(zhǎng)時(shí)間只有2年的甘草，只要我們掌握了它們的質(zhì)量規(guī)律，也可以被科學(xué)合理地使用。如生長(zhǎng)時(shí)間2年的栽培甘草及白城生產(chǎn)的甘草中有較高含量的甘草香豆素、甘草醇等，可以滿足特殊的需要。 本論文的特色與創(chuàng)新之處：(1)完善并提高了甘草藥材