人端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶在宮頸上皮內(nèi)瘤變及宮頸癌組織中的表達(dá)研究.pdf

1、背景目的:宮頸癌是最常見(jiàn)的女性生殖道惡性腫瘤，細(xì)胞學(xué)檢查、人乳頭瘤病毒(HPV)檢測(cè)和陰道鏡下活檢能及時(shí)發(fā)現(xiàn)宮頸上皮內(nèi)瘤變(CIN)，有效地降低了宮頸癌的發(fā)病率和死亡率。CIN的轉(zhuǎn)歸包括自然消退、持續(xù)不變和病變進(jìn)展，如何預(yù)測(cè)病變進(jìn)展是最受關(guān)注的臨床問(wèn)題。端粒酶活化是細(xì)胞永生化和腫瘤形成發(fā)展的共同途徑。端粒酶的催化亞單位端粒酶逆轉(zhuǎn)錄酶(hTERT)的表達(dá)上調(diào)與端粒酶活性相平行，檢測(cè)hTERT表達(dá)可代替端粒酶活性。本研究檢測(cè)宮頸組織中hTE

2、RTmRNA的表達(dá)變化，并對(duì)石蠟切片進(jìn)行hTERT免疫組化染色，為發(fā)現(xiàn)更可能進(jìn)展的CIN提供客觀依據(jù)，對(duì)CIN的轉(zhuǎn)歸預(yù)測(cè)和分流處理有重要臨床意義。 內(nèi)容方法 1、收集陰道鏡下活檢手術(shù)所取的新鮮宮頸組織標(biāo)本，同時(shí)收集相應(yīng)的石蠟包埋組織塊切片，以組織病理學(xué)的結(jié)果為最終診斷并分組； 2、對(duì)陰道鏡下活檢手術(shù)取得的新鮮宮頸組織標(biāo)本，運(yùn)用半定量RT-PCR方法檢測(cè)hTERTmRNA的表達(dá)陽(yáng)性率和表達(dá)水平，探討hTERT在CI

3、N和宮頸癌的發(fā)生、發(fā)展過(guò)程中的作用和機(jī)制； 3、運(yùn)用免疫組化方法檢測(cè)宮頸組織石蠟切片中hTERT蛋白水平的表達(dá)和分布情況，探討其作為宮頸病變轉(zhuǎn)歸預(yù)測(cè)標(biāo)記物的可能性。 研究結(jié)果: 1、共收集陰道鏡下活檢手術(shù)所取的新鮮宮頸組織標(biāo)本54例，平均年齡(37.5±9.6)歲。同時(shí)收集相應(yīng)的蠟塊切片49例，平均年齡(37.7±9.3)歲。根據(jù)組織病理學(xué)的結(jié)果分為4組：慢性宮頸炎組，CINⅠ組，CINⅡ/Ⅲ組和宮頸癌組。慢性宮

4、頸炎組設(shè)為對(duì)照組。 2、hTERT在宮頸組織中核酸水平的表達(dá)hTERTmRNA表達(dá)陽(yáng)性率分別為：慢性宮頸炎組0％(0/12)，CINⅠ組14.3％(2/14)，CINⅡ/Ⅲ組47.4％(9/19)，宮頸癌組88.9％(8/9)，并且表達(dá)強(qiáng)度隨病變級(jí)別升高有增加趨勢(shì)。慢性宮頸炎組與CINⅠ組陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異(P=0.173)，其余各組間均有顯著性差異。 3、hTERT在宮頸組織中蛋白水平的表達(dá)慢性宮頸炎組、CINⅠ、CI

5、NⅡ/Ⅲ和宮頸癌組中，hTERT的表達(dá)陽(yáng)性率依次為0％(0/10)、23.1％(3/13)、52.9％(9/17)和88.9％(8/9)。隨著宮頸病變的發(fā)生、發(fā)展，hTERT的陽(yáng)性率逐漸升高，著色強(qiáng)度逐漸增加。慢性宮頸炎組與CINⅠ組無(wú)顯著性差異(P=0.103)，慢性宮頸炎與CINⅡ/Ⅲ組、宮頸癌組有極顯著性差異。CINⅠ組與CINⅡ/Ⅲ組、CINⅡ/Ⅲ組與宮頸癌組之間有顯著性差異。 結(jié)論: 1.慢性宮頸炎組未檢測(cè)到h