外源性GM1對(duì)癲癇大鼠NGF在海馬和大腦皮層表達(dá)的影響.pdf

1、中國醫(yī)科大學(xué)碩士學(xué)位論文外源性GM1對(duì)癲癇大鼠NGF在海馬和大腦皮層表達(dá)的影響姓名：張強(qiáng)申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：碩士專業(yè)：神經(jīng)病學(xué)指導(dǎo)教師：何志義20000401鼠首先于lo％水合氯醛腹腔麻醉(100mg／kg)，開胸、暴露心臟，給予左心室插管，肝素化生理鹽水250mi沖洗后，分兩步進(jìn)行：免疫組化標(biāo)本制備，予4％多聚甲醛磷酸鹽緩沖液(pH74)250mi左心室灌注，斷頭，取腦，按Paxious大鼠腦立體定位圖制成有海馬(含CAl區(qū))及相應(yīng)大腦皮層

2、的標(biāo)本、充分固定，常規(guī)脫水。侵蠟，制成7pm厚切片。采用鏈霉素一親生物素過氧化物酶法(SABC法)，用免疫組化方法檢測NGF在海馬和大腦皮層神經(jīng)細(xì)胞表達(dá)情況。電鏡標(biāo)本制備，予25％戊二醛磷酸鹽緩沖液(PH74)250mi左心室貫注后，斷頭，取腦，制成有海馬(含CAl區(qū))及相應(yīng)大腦皮層標(biāo)本，鋨酸后固定，常規(guī)脫水，環(huán)氧樹脂812包埋，超薄切片機(jī)切片，醋酸鈾、檸檬酸鉛雙重染色，用透射電鏡觀察拍片。結(jié)果癲癇判定標(biāo)準(zhǔn)。I級(jí)，面肌抽搐出現(xiàn)咀嚼運(yùn)動(dòng)；

3、Ⅱ級(jí)，頸部肌肉抽搐出現(xiàn)點(diǎn)頭運(yùn)動(dòng)；置級(jí)，一側(cè)前肢陣攣；Ⅳ級(jí)，雙側(cè)前肢陣攣；V級(jí)，雙側(cè)前肢陣攣，失去平衡跌倒。A、B兩組大鼠無癲癇發(fā)作，c、D兩組大鼠均有l(wèi)—V級(jí)癲癇發(fā)作。通過電鏡觀察：A、B兩組大鼠神經(jīng)細(xì)胞結(jié)構(gòu)完好，核仁清晰，染色質(zhì)均勻分布，線粒體結(jié)構(gòu)完整。C組神經(jīng)細(xì)胞明顯水腫，核仁模糊，染色質(zhì)聚集，線粒體腫脹。D組神經(jīng)細(xì)胞受損程度明顯輕于C組。免疫組化染色結(jié)果顯示：癲痛鼠神經(jīng)細(xì)胞NGF表達(dá)高于未致痛鼠(P005)。在癲癇鼠中GMl干預(yù)鼠