電針和NEP1-40對局灶性腦梗死大鼠皮質(zhì)脊髓束可塑性的影響.pdf

1、目的：大腦半球運動區(qū)皮質(zhì)錐體細(xì)胞及其軸突組成皮質(zhì)脊髓束(corticospinal tract，CST)是控制肢體運動的直接中樞神經(jīng)結(jié)構(gòu)，腦卒中導(dǎo)致 CST 的直接損傷是引起其運動功能障礙(癱瘓)的直接神經(jīng)結(jié)構(gòu)基礎(chǔ)，因此研究 CST 通路的可塑性及其調(diào)節(jié)機制是研究腦卒中后肢體癱瘓康復(fù)機制的核心問題。在脊髓損傷模型中，NEP1-40鞘內(nèi)注射顯示其可通過調(diào)節(jié)RhoA信號通路的活動影響CST可塑性，NEP1-40用于腦梗死患者是否同樣有效不清

2、楚。針刺治療有促進(jìn)腦卒中患者癱瘓康復(fù)的作用，但其機制尚不清楚。我們應(yīng)用生物素葡聚糖胺(biotindextran amine，BDA)為神經(jīng)示蹤劑研究MCAO模型大鼠CST結(jié)構(gòu)可塑性，用經(jīng)顱電刺激誘發(fā)電位潛伏期和波幅變化反映CST功能可塑性，結(jié)合Montoya設(shè)計的“樓梯測試”評價癱瘓前肢抓取功能，研究電針干預(yù)和NEP1-40側(cè)腦室灌注對MCAO模型大鼠 CST 可塑性和功能康復(fù)的影響，探討 NEF1-40用于腦梗死的臨床可能性和電針治

3、療促進(jìn)腦梗死患者癱瘓康復(fù)的機制。 方法：①采用成年的SD大鼠，經(jīng)“樓梯測試”訓(xùn)練后，選擇36只左利爪的大鼠隨機分為正常組、假手術(shù)組、缺血對照組、電針干預(yù)組，PBS側(cè)腦室灌注組和NEP1-40側(cè)腦室灌注組六組，并在MCAO造模前1天、MCAO術(shù)后第7天、第14天和第21天進(jìn)行前肢功能測試。②正常組不作處理，假手術(shù)組僅作頸外動脈結(jié)扎，缺血對照組、電針干預(yù)組、PBS側(cè)腦室灌注組和NEP1-40側(cè)腦室灌注組作MCAO模型，PBS側(cè)腦室灌

4、注組和NEP1-40側(cè)腦室灌注組大鼠MCAO造模成功后分別進(jìn)行PBS和NEP1-40側(cè)腦室灌注。③MCAO造模后第7天，六組大鼠用微量注射器將15％的BDA緩慢注射入左側(cè)第一運動皮質(zhì)區(qū)。④BDA注射后，電針干預(yù)組進(jìn)行電針刺激“合谷”、“曲池”15min，連續(xù)治療14天，缺血對照組像電針干預(yù)組一樣牽拉15min。⑤六組大鼠在MCAO后第21天，先進(jìn)行MEP檢測，然后灌注固定取出腦和脊髓組織在低溫冰箱中保存，冰凍切片后用熒光顯微鏡觀察BDA

5、被軸突攝取后示蹤CST的情況。 結(jié)果：①BDA左側(cè)皮質(zhì)注射后被軸突攝取，左側(cè)大腦注射區(qū)內(nèi)大腦皮層的錐體細(xì)胞及其發(fā)出的軸突呈廣泛的熒光顯影，隨著時間推移，被大腦皮質(zhì)軸突攝取的BDA沿著CST 順行長距離傳輸?shù)竭_(dá)中腦和頸膨大處。②NEP1-40側(cè)腦室灌注組MCAO大鼠頸膨大處的 CST 軸突發(fā)芽數(shù)量明顯多于PBS側(cè)腦室灌注組，其新生軸突橫穿中線到達(dá)對側(cè)，提示NEP1-40側(cè)腦室灌組可促進(jìn)CST可塑性。③經(jīng)電針干預(yù)的MCAO大鼠CST

6、軸突呈現(xiàn)NEP1-40側(cè)腦室灌注相似改變，其新生軸突橫穿中線到達(dá)對側(cè)，提示電針刺激亦可促進(jìn)CST可塑性。④各組大鼠在MCAO造模術(shù)前第1天左前肢抓取能力比較無統(tǒng)計學(xué)差異(P>0.05)；電針干預(yù)組和NEP1-40側(cè)腦室灌注組MCAO術(shù)后第14天和21天的左前肢抓取能力明顯高于缺血對照組(P<0.05)，但低于PBS側(cè)腦室灌注組和假手術(shù)組(P<0.05)，提示電針治療和NEP1-40干預(yù)治療有助于MCAO大鼠前肢功能恢復(fù)。⑤在MCAO術(shù)后

7、的第21天，缺血對照組、PBS組、針刺組和NEP1-40組損傷側(cè)的MEP潛伏期均較正常組和假手術(shù)組明顯延長，波幅明顯降低。缺血對照組與PBS組兩組間MEP潛伏期和波幅比較無統(tǒng)計學(xué)差異；針刺組MEP潛伏期延長程度不及缺血對照組和PBS組，相互比較差異有顯著性，針刺組 MEP 波幅降低程度亦不及缺血對照組和PBS組，相互比較差異有顯著性；NEP1-40組MEP 潛伏期和波幅變化趨勢與針刺組一致，MEP潛伏期延長程度不及缺血對照組和PBS組，

8、相互比較差異有顯著性，MEP波幅降低程度亦不及缺血對照組和PBS組，相互比較差異有顯著性；提示電針和NEP1-40干預(yù)治療可以改善CST功能。 結(jié)論：①BDA大腦皮質(zhì)注射可有效示蹤大鼠皮質(zhì)脊髓束。②“樓梯測試”能簡單、可靠、定量地反映大鼠前肢抓取功能變化。③MEP 可有效反映CST功能變化。④NEP1-40側(cè)腦室灌注可改善MCAO大鼠CST 可塑性和前肢抓取功能。⑤電針治療可改善MCAO大鼠CST 可塑性和前肢抓取功能。這些研究