鵝催乳素受體基因的克隆和表達(dá).pdf

1、本試驗(yàn)對(duì)鵝催乳素受體基因(PRLR)部分序列進(jìn)行了克隆和表達(dá)，分別獲得一個(gè)606bp的片斷和500 bp的片斷，并且在鵝不同組織中進(jìn)行表達(dá)，從而為研究禽類抱性分子機(jī)理提供理論依據(jù)。 性成熟后的洪澤湖鵝屠宰后取腎、肝、睪丸、輸精管、卵巢、脾、大腸、心，提取總RNA，從總RNA中分離mRNA，(1)對(duì)PRLR基因編碼區(qū)部分(EST)的克隆，克隆到了一個(gè)606 bp的鵝催乳素受體基因的片段，通過(guò)與雞催乳素受體序列比對(duì)分析表明，此片段位

2、于閱讀框(open reading frame，ORF)內(nèi)，含催乳素受體部分外顯孚9(148 bp)，外顯子10(179 bp)，外顯子11(145 bp)，外顯于12(100 bp)，部分外顯子13(43 bp)。PRLR片段(EST)的同源擴(kuò)增產(chǎn)物(606bp)與雞催乳素受體基因序列分析，經(jīng)過(guò)比較，發(fā)現(xiàn)兩者蛋白質(zhì)與氨基酸序列分別基本相同，說(shuō)明本試驗(yàn)擴(kuò)增的確實(shí)是鵝的基因序列，而不是其他動(dòng)物的基因序列。(2)以5’RACE產(chǎn)物作為模板，

3、采用5’RACE-PCR技術(shù)，我們得到了一個(gè)500 bp的片段，測(cè)序結(jié)果與雞的序列比對(duì)表明，這一片段含239 bp的第1外顯子，69 bp的第2外顯子，114 bp的第3外顯子及81 bp的第4外顯子(部分)，5’UTR區(qū)跨第l、2、3外顯子及部分第4外顯子。序列比對(duì)發(fā)現(xiàn)，外顯子1與報(bào)道的雞PRLR第1外顯子無(wú)法配對(duì)；外顯子2、3可以配對(duì)。同時(shí)根據(jù)擴(kuò)增的EST與5’端序列分析中發(fā)現(xiàn)，編碼區(qū)在進(jìn)化上相對(duì)保守，而5’-UTR相對(duì)不保守。根據(jù)