高壓氧及促紅細(xì)胞生成素治療對(duì)新生大鼠缺氧缺血性腦損傷的神經(jīng)保護(hù)作用.pdf

1、目的：探討高壓氧(HBO)和促紅細(xì)胞生成素(EPO)早期干預(yù)治療對(duì)新生鼠缺氧缺血性腦損傷(HIBD)后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞激活及其向神經(jīng)元分化影響的動(dòng)態(tài)變化，以及學(xué)習(xí)記憶功能改善情況。
　　 方法：選擇7日齡新生Wistar大鼠制備新生鼠HIBD模型，設(shè)置假手術(shù)組、HIBD對(duì)照組、HBO治療組、EPO治療組和HBO4+EPO聯(lián)合治療組。HE染色光鏡下觀察腦組織病理改變：通過(guò)免疫組化方法和計(jì)算機(jī)圖像分析技術(shù)檢測(cè)各組大鼠不同時(shí)點(diǎn)(術(shù)后4

2、d、7d、14d、21d)海馬齒狀回(DG)巢蛋白(Nestin)、海馬CA1區(qū)生長(zhǎng)相關(guān)蛋白(GAP-43)、海馬LMOL區(qū)膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)的表達(dá)變化；及采用Morris水迷宮檢測(cè)各組大鼠的學(xué)習(xí)記憶功能。
　　 結(jié)果：1.腦組織病理改變：假手術(shù)組大鼠腦組織無(wú)異常病理改變；HIBD對(duì)照組大鼠海馬錐體細(xì)胞層次減少、排列紊亂，術(shù)后4～7d出現(xiàn)膠質(zhì)細(xì)胞增生，大量神經(jīng)細(xì)胞核固縮、碎裂，術(shù)后14～21d大量神經(jīng)元丟失，膠質(zhì)瘢痕形

3、成；HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組大鼠腦病理改變較HIBD對(duì)照組明顯減輕。2.Nestin表達(dá)：各時(shí)點(diǎn)HIBD對(duì)照組nestin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)較假手術(shù)組增加(P<0.01)；HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組nestin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)均較HIBD對(duì)照組增加(P<0.01)，EPO治療組nestin陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)與HBO治療組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；HBO+EPO聯(lián)合治療組較同時(shí)點(diǎn)HBO治療組、E

4、PO治療組增加，在術(shù)后4d、7d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在術(shù)后14d、21d比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。3.海馬GAP-43的表達(dá)：各時(shí)點(diǎn)對(duì)照組CA1區(qū)GAP-43表達(dá)較假手術(shù)組增強(qiáng)，于術(shù)后7d達(dá)高峰，兩組比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；各治療組GAP-43表達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，聯(lián)合治療組增強(qiáng)最明顯，于術(shù)后14d達(dá)高峰，EPO治療組GAP-43表達(dá)與HBO治療組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)；H

5、BO+EPO聯(lián)合治療組較同時(shí)點(diǎn)HBO治療組、EPO治療組增加，在術(shù)后4d、7d、14d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在術(shù)后21d比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。4.海馬GFAP的表達(dá)：各時(shí)點(diǎn)對(duì)照組GFAP表達(dá)較假手術(shù)組增強(qiáng)，兩組比較差別有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)；各治療組GFAP表達(dá)較對(duì)照組明顯增強(qiáng)，聯(lián)合治療組增強(qiáng)最明顯，于術(shù)后14d達(dá)高峰，EPO治療組GFAP表達(dá)與HBO治療組比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)

6、；HBO+EPO聯(lián)合治療組較同時(shí)點(diǎn)HBO治療組、EPO治療組增加，在術(shù)后4d、7d、14d比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P<0.05)，但在術(shù)后21d比較差異均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)。5、學(xué)習(xí)記憶能力：假手術(shù)組、HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組與HIBD對(duì)照組比較，逃避潛伏期明顯縮短，HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組三組間逃避潛伏期無(wú)顯著性差異，假手術(shù)組與HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO

7、聯(lián)合治療組比較，逃避潛伏期明顯縮短；假手術(shù)組、HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組穿環(huán)指數(shù)高于對(duì)照組，HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組三組間穿環(huán)指數(shù)無(wú)顯著性差異，假手術(shù)組穿環(huán)指數(shù)高于HBO治療組、EPO治療組和HBO+EPO聯(lián)合治療組(P<0.05)。
　　 結(jié)論：1.EPO及HBO早期干預(yù)治療可減輕新生鼠HIBD后神經(jīng)細(xì)胞的變性、壞死；2.新生鼠缺氧缺血性腦損傷后腦缺血易損傷區(qū)Nestin、

8、GAP-43、GFAP的表達(dá)增加，可能與腦損傷后內(nèi)源性神經(jīng)干細(xì)胞激活、神經(jīng)再生和突觸重塑有關(guān)；3、早期給予HBO及外源性EPO治療可增加新生鼠HIBD后中樞神經(jīng)系統(tǒng)的Nestin、GAP-43、GFAP表達(dá)，HBO與EPO聯(lián)合治療增加更明顯；并且可以改善新生鼠HIBD后的學(xué)習(xí)記憶功能；4、HBO及外源性EPO治療對(duì)新生鼠缺氧缺血腦損傷的神經(jīng)修復(fù)和再生具有保護(hù)作用，為臨床上應(yīng)用HBO及EPO治療新生兒窒息后腦損傷，減少神經(jīng)系統(tǒng)后遺癥提供了