鱖病毒和嗜水氣單胞菌二聯(lián)疫苗研究.pdf

1、鱖(Sinipercachuastsi)是我國的淡水名貴魚類，具有很高的經濟價值和出口創(chuàng)匯能力，但自1993年以來，鱖疾病流行，給鱖的養(yǎng)殖生產帶來巨大的經濟損失。由于鱖的人工養(yǎng)殖歷史較短，并且以前的研究大多集中于鱖繁殖，飼養(yǎng)等方面，因此對鱖疾病一直沒有有效的防治措施。鱖病毒病(Sinipercachuastsivirusdisease)和嗜水氣單胞菌病(Aeromonashydrophiladisease)是危害鱖養(yǎng)殖業(yè)最主要的兩種疾病

2、，且這兩種疾病經常混合感染，因此研制能預防這兩種疾病的二聯(lián)疫苗必將會大大促進鱖養(yǎng)殖業(yè)的發(fā)展。本研究在檢測嗜水氣單胞菌GYK1株菌制成的全菌滅活疫苗和脂多糖亞單位疫苗以及大腸桿菌表達的鱖病毒主要衣殼蛋白疫苗免疫劑量和效果的基礎上，用嗜水氣單胞菌脂多糖和鱖病毒主要衣殼蛋白制成二聯(lián)疫苗，檢測了該二聯(lián)疫苗的免疫效果。 1.鱖嗜水氣單胞菌全菌疫苗和脂多糖疫苗免疫效果比較 用滅菌生理鹽水配制濃度為1.0×108cfu/ML、3.0×

3、108cfu/mL、6.0×108cfu/mL的嗜水氣單胞菌全菌滅活疫苗，以腹腔每尾注射0.2mL免疫鱖，用滅菌生理鹽水稀釋的嗜水氣單胞菌脂多糖按20μg/g、25μg/g和30μg/g魚體重劑量腹腔注射，同時對照組注射0.2mL生理鹽水，通過檢測試驗鱖的抗體效價和免疫保護率研究了嗜水氣單胞菌全菌疫苗和脂多糖疫苗對鱖的免疫效果。結果嗜水氣單胞全菌滅活疫苗和脂多糖免疫鱖后免疫效價都可達到128，攻毒相對保護率也相近，25μg/g脂多糖對鱖

4、的相對保護率達到83.3％，3.0×108cfu/mL嗜水氣單胞菌免疫組鱖的相對保護率達到77.8％，說明脂多糖的免疫效果較全菌疫苗略好。 2.鱖病毒MCP亞單位疫苗免疫效果 在預試驗的基礎上，分別用鱖病毒主要衣殼蛋白按魚體重0.5μg/g、1.0μg/g、1.5μg/g和2.0μg/g劑量腹腔注射免疫鱖，通過檢測免疫鱖的血清抗體效價和相對免疫保護率來評價該疫苗的最佳免疫劑量和免疫效果。結果鱖病毒主要衣殼蛋白的最佳免疫劑

5、量為1.0μg/g，免疫鱖的血清抗體效價最高達到960，相對免疫保護率達到62.97％，而空白對照組的血清抗體效價只有30，說明大腸桿菌表達的鱖病毒主要衣殼蛋白具有較好的免疫原性。 3.鱖病毒與嗜水氣單胞菌二聯(lián)疫苗對鱖的免疫效果 用脂多糖和鱖病毒主要衣殼蛋白制成二聯(lián)疫苗，以腹腔注射的方式免疫鱖后通過檢測免疫鱖的血清抗體效價、溶菌酶活性、超氧化物歧化酶活性、外周血淋巴細胞酸性α-醋酸萘酯酶陽性率以及對病毒和細菌攻毒免疫保護

6、率的檢測，評價該二聯(lián)疫苗對鱖的免疫效果。結果二聯(lián)疫苗免疫鱖后誘導的抗體效價略低于單苗，免疫后第21d達到最高，然后開始下降，抗鱖病毒和嗜水氣單胞菌的效價分別達到640和96；免疫后鱖的血清溶菌酶和超氧化物歧化酶含量分別達到54.44μg/mL和75.94U/mL，而空白對照組的只有20.27μg/mL和60.37U/mL；免疫后一周二聯(lián)疫苗免疫組鱖外周血淋巴細胞酸性α-醋酸萘酯酶陽性率達到37.8％，而空白組只有16.4；免疫28d后分