阿魏酸鈉對單側(cè)輸尿管梗阻大鼠腎臟保護(hù)作用的實(shí)驗(yàn)研究.pdf

1、目的：阿魏酸鈉(SF)即3-甲氧基-4-羥基-苯丙烯酸鈉，是阿魏酸的合成鈉鹽，已被證明是一種非肽類內(nèi)皮素受體拮抗劑，可清除自由基，防治脂質(zhì)過氧化損傷；拮抗內(nèi)皮素引起的血管收縮、升壓、血管平滑肌細(xì)胞增值；減輕血管內(nèi)皮損傷、增加一氧化氮(NO)合成、松弛血管平滑肌。SF與腎間質(zhì)纖維化之間的關(guān)系如何，目前尚無定論。通過觀察腎小管上皮細(xì)胞磷酸化p38MAPK、TGF-β1、α平滑肌肌動蛋白(α-SMA)的表達(dá)情況，研究阿魏酸鈉對單側(cè)輸尿管梗阻大

2、鼠腎間質(zhì)纖維化的保護(hù)作用，探討其腎臟保護(hù)作用的可能機(jī)制。 方法：選擇健康雄性SD大鼠36只(購自河北醫(yī)科大學(xué)試驗(yàn)動物中心)，體重180-220g，隨機(jī)分為假手術(shù)組(A組)12只，UUO模型組(B組)12只，阿魏酸鈉治療組(C組)12只。大鼠經(jīng)2％戊巴比妥鈉(50mg/kg)腹腔注射麻醉，仰臥位于手術(shù)臺上，經(jīng)側(cè)腹部切口，暴露左側(cè)腎臟，分離左側(cè)輸尿管于中上1/3處結(jié)扎并剪斷，關(guān)閉腹腔，逐層縫合，A組開腹后不結(jié)扎輸尿管，隨即縫合腹腔作

3、為對照。C組在術(shù)前3天給予阿魏酸鈉(阿魏酸鈉片溶于0.9％生理鹽水中，以110mg/kg/d給約)灌胃，A、B兩組僅以生理鹽水灌胃(2mL/d)作為對照，實(shí)驗(yàn)期間大鼠自由進(jìn)食。分別至大鼠術(shù)后3、7、14天將其斷頭處死，迅速開腹，切取左腎，剝離腎周脂肪組織，按冠狀位縱行剖開，立即置于10％中性甲醛溶液中固定48小時(shí)，然后行石蠟包埋，分別用于光鏡、蘇木素伊紅染色(HE染色)、馬松染色(Masson染色)以及免疫組織化學(xué)染色。應(yīng)用馬松染色法觀

4、察3組大鼠腎間質(zhì)纖維化的程度，HE染色法觀察腎間質(zhì)面積改變，炎癥細(xì)胞浸潤與腎小管上皮細(xì)胞及管腔形態(tài)變化等。采用免疫組織化學(xué)法即SP法檢測磷酸化p38MAPK在3組大鼠腎組織中的表達(dá)和定位，以及腎小管上皮細(xì)胞中TGF-β1、α-SMA的表達(dá)情況，采用單因素方差分析法分別在不同時(shí)間點(diǎn)將3組作比較，并在一組內(nèi)將不同時(shí)間點(diǎn)樣本兩兩間進(jìn)行t檢驗(yàn)。并在B組內(nèi)將3個(gè)免疫組化指標(biāo)表達(dá)量變化進(jìn)行相關(guān)性分析。應(yīng)用SAS統(tǒng)計(jì)軟件進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析。 結(jié)論：