自噬相關(guān)分子在ⅢB期結(jié)腸癌中的異常表達(dá)及其意義.pdf

1、背景與目的：自噬（autophagy）是細(xì)胞利用溶酶體降解自身受損的細(xì)胞器和大分子物質(zhì)的過程，是真核細(xì)胞特有的生命現(xiàn)象；在維持細(xì)胞自我穩(wěn)態(tài)、促進(jìn)細(xì)胞生存、阻止染色體異常、維持基因組穩(wěn)定性，介導(dǎo)腫瘤細(xì)胞耐藥方面起著重要作用。但持續(xù)激活的自噬也可以引起細(xì)胞死亡，即“自噬性細(xì)胞死亡”，也稱為Ⅱ型程序化細(xì)胞死亡。自噬活性的異常與腫瘤的發(fā)生、發(fā)展有著直接的關(guān)系，已成為目前探討腫瘤發(fā)生和抑制腫瘤生長(zhǎng)、克服腫瘤化療耐藥性研究的新靶點(diǎn)。目前自噬與結(jié)腸癌

2、的關(guān)系相當(dāng)復(fù)雜，很有必要進(jìn)一步研究。本研究觀察自噬信號(hào)傳導(dǎo)通路上的關(guān)鍵調(diào)節(jié)分子Beclinl、mTOR/pmTOR、LC3在ⅢB期結(jié)腸癌組織中的異常表達(dá)情況，進(jìn)一步探討其意義和預(yù)測(cè)患者預(yù)后的價(jià)值，并試圖探討自噬對(duì)人類結(jié)腸癌發(fā)展的作用，為干預(yù)自噬現(xiàn)象提供初步依據(jù)。 材料與方法：收集我院1999年1月至2003年7月經(jīng)過根治性手術(shù)治療并有完整隨訪資料的104例ⅢB期結(jié)腸癌患者的臨床資料和石蠟包埋的組織標(biāo)本，采用免疫組織化學(xué)方法檢測(cè)自

3、噬相關(guān)分子Beclinl、mTOR/pmTOR、LC3在癌組織及相應(yīng)的近癌旁正常組織的表達(dá)水平，分析它們的表達(dá)情況與患者臨床病理資料的相關(guān)性及各分子相互之間的關(guān)系；進(jìn)一步分析上述蛋白表達(dá)情況對(duì)患者預(yù)后的影響。另用免疫熒光雙染的方法探討自噬相關(guān)分子的一些作用機(jī)制。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果：該組病例ⅢB期結(jié)腸癌五年總生存率為65.4％。Beclinl、LC3蛋白高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞膜、胞漿和（或）細(xì)胞核，正常粘膜缺乏Beclinl、LC3表達(dá)。腫瘤組

4、織Beclinl陽性率為83.7％、LC3陽性率達(dá)70.2％。mTOR及pmTOR蛋白高表達(dá)于腫瘤細(xì)胞膜、細(xì)胞漿；腫瘤組織mTOR、pmTOR陽性率分別為為75.9％、76.9％。pmTOR不僅在腫瘤中心細(xì)胞高表達(dá)，還可見腫瘤浸潤(rùn)前沿細(xì)胞高表達(dá)。非參數(shù)相關(guān)性分析，pmTOR與LC3、Beclinl均成正相關(guān)，LC3與T分期呈負(fù)相關(guān)，病理分級(jí)與病理類型呈正相關(guān)，差別均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。其余各指標(biāo)及臨床病理資料無相關(guān)性。單因素生存分析中T分期、

5、病理類型、Beclinl表達(dá)是影響ⅢB期結(jié)腸癌患者腫瘤特異性生存率的預(yù)后因子，其它臨床病理參數(shù)如年齡、性別、發(fā)病部位、病理分級(jí)及分子標(biāo)記LC3，mTOR，pmTOR對(duì)生存無預(yù)測(cè)意義，但LC3低表達(dá)、pmTOR在腫瘤浸潤(rùn)前沿細(xì)胞的高表達(dá)及年齡小于60歲的患者有增加死亡風(fēng)險(xiǎn)的趨勢(shì)。多因素生存回歸分析顯示T分期、病理類型和Beclinl表達(dá)情況是影響ⅢB期結(jié)腸癌患者腫瘤特異性生存率的獨(dú)立預(yù)后因子。免疫熒光雙染顯示Beclinl與PCNA表達(dá)成

6、負(fù)相關(guān)，證明Beclin降低死亡風(fēng)險(xiǎn)的機(jī)制之一是抑制腫瘤細(xì)胞增殖及細(xì)胞周期的進(jìn)行。 結(jié)論：本研究通過分析重要的自噬相關(guān)蛋白（Beclinl、mTOR和LC3）在局部晚期結(jié)腸癌組織的表達(dá)及其與臨床病理因素的關(guān)系。我們發(fā)現(xiàn)Beclinl普遍表達(dá)于結(jié)腸癌組織，高表達(dá)Beclinl的患者預(yù)后較好，這是首次報(bào)道的腫瘤組織Beclinl高表達(dá)可以降低死亡風(fēng)險(xiǎn)。其可能的原因之一是Beclinl延緩了腫瘤細(xì)胞的增殖速度及細(xì)胞周期的進(jìn)行。我們進(jìn)一

7、步還觀察到mTOR以及pmTOR高表達(dá)于結(jié)腸癌組織，pmTOR在腫瘤浸潤(rùn)前沿的高表達(dá)有助于腫瘤浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移；mTOR/自噬信號(hào)通路可望成為結(jié)腸癌預(yù)防和治療干預(yù)的一個(gè)很有前景的新的分子靶標(biāo)。此外，我們觀察到LC3異位表達(dá)于細(xì)胞核，LC3異位表達(dá)可能與腫瘤的異常增殖及染色體不穩(wěn)定有關(guān)。上述研究說明自噬相關(guān)分子在結(jié)腸癌的發(fā)展過程中起著重要作用。在將來的工作中，隨著自噬分析技術(shù)的進(jìn)步，應(yīng)重點(diǎn)研究自噬現(xiàn)象對(duì)結(jié)腸癌轉(zhuǎn)歸的作用以及在藥物治療過程中自噬現(xiàn)