毛細管電泳分析茶黃素類和茶多酚的方法與應用研究.pdf

1、茶多酚及其氧化產(chǎn)物茶黃素類是茶葉中重要的生化品質成分，也是對人體健康最為有益的物質。為了建立茶多酚和茶黃素類的高效、快速、簡便的分析方法，本文對毛細管電泳儀分析茶黃素類和茶多酚的分離檢測條件進行了系統(tǒng)優(yōu)化和方法評估，并將建立的方法應用于茶葉品質檢測、茶黃素類體外酶促氧化過程監(jiān)控和茶葉深加工產(chǎn)品(茶多酚、茶黃素類等)質量的檢驗。研究結果如下： 1.建立了毛細管電泳分析茶黃素類的方法。在250mmol/LH3BO4、10mmol/L

2、KH2PO4、0.75mmol/LSDS和20％(v/v)乙腈組成的pH值為7.5的電泳介質中，選擇25kV電壓、20℃柱溫和200m波長檢測，可在10min以內(nèi)將標樣中的四種主要茶黃素類單體分離，并獲得較高的檢測靈敏度。四種茶黃素類單體濃度與峰面積值之間的相關系數(shù)r=0.9945～0.9990，檢測限在0.64～0.53μg/ml之間，加標回收率為92.50～108.36％，變異系數(shù)≤2.67％。應用該方法分析了紅茶樣品和茶黃素類產(chǎn)品

3、中TFs的含量，紅茶茶湯樣品需用乙酸乙酯萃取處理才可達到較好的分離效果和基線水平，而茶黃素類產(chǎn)品則可不經(jīng)萃取處理，直接溶解進行分析，證明該方法可快速、準確分析茶黃素類產(chǎn)品中茶黃素類的含量。 2.建立了毛細管電泳同時分析六種兒茶素類的方法。用含有200mmol/LH3BO4(pH7.7)、10mmol/LKH2PO4、9mmol/Lβ-CD和27.5％乙腈(v/v)的電泳介質，在電壓25kV、柱溫30℃下分離和波長200nm處檢測

4、，可在7.5min以內(nèi)將EGCG、ECG、EC、EGC、GC和C六種兒茶素組分全部分離，有效提高了EGC/EC/C、EGCG/ECG之間的分離度，各組分標樣濃度與峰面積值之間呈良好的線性關系，相關系數(shù)r=0.9985～0.9998，檢測限為0.39～0.78μg/ml，各組分的加標回收率在96.60～113.83％之間，方法變異系數(shù)小于3.54％。 3.確立了毛細管電泳同時分析四種茶黃素類和六種兒茶素類的方法。應用2中所述的緩沖

5、體系和電泳條件，不僅可將六種兒茶素類化合物分離，且可同時分離四種茶黃素類物質，使這十種物質在8min內(nèi)全部基線分離，峰形良好，各組分標樣濃度與峰面積值之間呈良好的線性關系，相關系數(shù)r=0.9907～0.9998，檢測限為0.39～0.78μg/ml，各組分的加標回收率在91.53～113.49％之間，方法變異系數(shù)小于5％。應用該方法對茶多酚氧化制備茶黃素類的動力學進行研究，可同時測定反應物的種類、含量變化趨勢和生成物的種類、變化趨勢，且

6、快速、準確、簡便，是一種特別適合于對茶多酚氧化制備茶黃素類過程中監(jiān)測兒茶素類和茶黃素類變化的方法。 4.在毛細管電泳同時分析四種茶黃素類和六種兒茶素類化合物的基礎上，進一步研究同時分析四種茶黃素類、六種兒茶素類、蘆丁、槲皮素、對香豆酸、綠原酸等茶多酚和咖啡堿共十五種物質的方法與應用。改變電泳介質組分乙腈的濃度由原來的27.5％降至25％(v/v)，其余組成和濃度均不改變，在柱溫30℃，電壓30kV和毛細管規(guī)格為50μm×50cm