廣西羅城毛葡萄組織培養(yǎng)脫毒技術(shù)研究.pdf

1、本實(shí)驗(yàn)以廣西羅城毛葡萄主栽品種九龍二號、12號，二號為實(shí)驗(yàn)材料，分別以這三個(gè)品種的莖尖和幼嫩葉片為外植體，通過直接誘導(dǎo)叢生芽進(jìn)行快速繁殖，并獲得無根苗。同時(shí)運(yùn)用熱處理和莖尖培養(yǎng)結(jié)合來誘導(dǎo)毛葡萄脫毒苗，進(jìn)行脫毒技術(shù)研究。實(shí)驗(yàn)分別從誘導(dǎo)、分化、增殖、生根、移栽等方面，探討了羅城毛葡萄組織培養(yǎng)過程中培養(yǎng)基與激素配比、外植體的取材季節(jié)、取材部位、糖份對芽的形成和生長的影響以及培養(yǎng)過程中出現(xiàn)的褐化、玻璃化等問題。同時(shí)還對試管脫毒苗進(jìn)行酶聯(lián)免疫法檢

2、測脫毒情況以及測定脫毒苗的一些生理指標(biāo)。 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，外植體的取材季節(jié)、取材部位均影響毛葡萄的滅菌效果以及萌芽率。毛葡萄外植體的采集以3~5月份為佳，存活率高，污染少，對芽的誘導(dǎo)也比較有利。同一枝條以中上部莖段較為有利。在芽的誘導(dǎo)中以蔗糖較葡萄糖有利于芽的形成。1/2MS培養(yǎng)基要比MS培養(yǎng)基的芽誘導(dǎo)率要高。6-BA與IAA組合較與NAA組合更有利于芽的形成。其中以6-BA2.0mg/L+IAA0.2mg/L的誘導(dǎo)效果最好。在繼

3、代培養(yǎng)中，以MS+6-BA1.0 mg/L+IAA0.01mg/L為繼代培養(yǎng)基，植株生長快，繁殖系數(shù)為4.0。在外植體誘導(dǎo)芽的過程中，外植體比較容易出現(xiàn)褐化現(xiàn)象，本實(shí)驗(yàn)采用了活性炭、聚乙烯吡咯烷酮（PVP）防褐化比較實(shí)驗(yàn)，發(fā)現(xiàn)聚乙烯吡咯烷酮效果較為理想，其中濃度為1﹪時(shí)抑制褐化效果最佳。在毛葡萄繼代培養(yǎng)中，為減輕玻璃化現(xiàn)象，要使其在3000LX的強(qiáng)光照下培養(yǎng)。無根苗接種于1/2MS +BA0.2mg/L +IBA0.6mg/L的培養(yǎng)基中