2023年全國碩士研究生考試考研英語一試題真題(含答案詳解+作文范文)_第1頁
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文檔簡介

1、目的:牙齦卟啉單胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)是慢性牙周炎病變區(qū)域或活動部位最主要的優(yōu)勢菌,該菌通過其主要黏附因子菌毛蛋白A(fimbria proteinA,FimA)黏附并入侵牙齦上皮細胞,與Pg毒力密切相關(guān);同時FimA是Pg的表面抗原成分,具有良好的免疫反應(yīng)性。本實驗克隆了牙齦卟啉單胞菌菌毛蛋白fimA基因,使其在大腸桿菌中正確表達,純化,旨在為研制增強免疫應(yīng)答的高效牙周炎真核表達質(zhì)粒提供抗原。<

2、br>   方法:利用PCR 方法克隆牙齦卟啉單胞菌fimA基因,構(gòu)建原核表達質(zhì)粒PT-BAD/fimA,獲得在大腸桿菌中的表達,基體輔助激光解吸電離-飛行時間質(zhì)譜(MALDI-TOF-MS)鑒定重組蛋白。以不同濃度咪唑緩沖液(250uM、200 uM、150 uM、100 uM、50 uM)洗脫結(jié)合在His-tag 純化柱的目的蛋白,選擇最佳洗脫濃度。
   結(jié)果:克隆基因測序結(jié)果與GenBank 數(shù)據(jù)庫中的序列呈現(xiàn)99.9

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