羊痘病毒結(jié)構(gòu)蛋白P32基因的克隆及其在大腸埃希氏菌中的表達(dá).pdf

1、羊痘(Capripox)是由羊痘病毒(Capripoxvirus)引起的綿羊(Sheep)和山羊(Goat)的一種急性、熱性、接觸性傳染病，被世界動物衛(wèi)生組織(OIE)列為A類傳染病，在我國被列為一類傳染病。羊痘病毒屬痘病毒科(poxvirdae)、脊椎動物痘病毒亞科(chordopoxvirnae)、羊痘病毒屬(capripoxvirus)的成員。羊痘病毒P32蛋白是目前世界各地分離、鑒定的所有羊痘病毒毒株所共有的且特異性很強(qiáng)的羊痘病

2、毒結(jié)構(gòu)蛋白，是位于羊痘病毒膜表面的主要結(jié)構(gòu)蛋白，含有中和抗原表位。 本研究應(yīng)用PCR技術(shù)，用特異性引物擴(kuò)增出羊痘病毒結(jié)構(gòu)蛋白P32基因，連接于pMD18-T載體，隨后以重組質(zhì)粒為模板用另一對特異性引物擴(kuò)增得到目的基因(855bp)，對目的基因和表達(dá)載體pET-30a，pGEX-4T-1分別以相同的限制性酶酶切后，構(gòu)建成重組表達(dá)載體，經(jīng)PCR、酶切鑒定和測序，證明成功構(gòu)建了重組表達(dá)載體pET-P32和pGEX-P32。經(jīng)IPTG誘