黃顙魚胰島素樣生長因子受體及結(jié)合蛋白基因的鑒定與表達.pdf

1、黃顙魚是一種重要的經(jīng)濟魚類，具有明顯的兩性生長異型，即同齡雄魚個體大于雌魚。IGF系統(tǒng)基因與生長發(fā)育緊密相關(guān)，而且其表達在魚類中具有雌雄差異。本實驗分析了IGF的效應因子IGF受體及調(diào)控因子IGF結(jié)合蛋白的序列特征和這些基因在下丘腦-垂體-性腺（HPG）軸組織的表達差異，并檢測性激素處理對部分IGF受體及IGF結(jié)合蛋白在性腺中表達的影響，為進一步探討黃顙魚性腺發(fā)育和生長發(fā)育提供了一些理論基礎。
　　主要研究結(jié)果如下：
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2、.黃顙魚IGF受體及IGF結(jié)合蛋白的序列分析
　　通過黃顙魚轉(zhuǎn)錄組數(shù)據(jù)分析得到IGF受體及IGF結(jié)合蛋白基因序列，并構(gòu)建了各基因在脊椎動物中的進化樹，分析其進化關(guān)系，并鑒定所得到的黃顙魚 IGFBP1、IGFBP2和IGFBP5分別為IGFBP1a、IGFBP2b和IGFBP5b。我們對IGF結(jié)合蛋白的結(jié)構(gòu)域進行比較分析，發(fā)現(xiàn)了很多特定結(jié)構(gòu)單元。如鋅指結(jié)構(gòu)域 CX2CX7C，CWCV基序，RGD基序，肝素結(jié)合序列YKKKQCRP，

3、核定位序列KGFFKRKQCKPSRGRKR等。這些特殊結(jié)構(gòu)賦予了基因許多不同的功能。
　　2.黃顙魚IGF受體及IGF結(jié)合蛋白的組織表達分析
　　IGF1R、IGF2R在精巢和卵巢中有明顯的差異表達(P<0.05)，IGFBP1、2、3、5、7在不同性腺中的表達略有差異，但不具有顯著性（P>0.05），說明黃顙魚的IGF受體可能與其性腺發(fā)育相關(guān)。在非性腺組織中有些基因的雌雄表達也具顯著差異，如IGF1R在雌雄肝臟中表達有明

4、顯差異，IGF2R在雌雄下丘腦及肝臟中表達具明顯差異， IGFBP1、2、3、5在雌雄個體肝臟中表達有顯著差異。此外，一些基因在某個組織中表達量較高，這暗示該基因可能具有某種特定功能。IGF1R的表達在精巢組織中最高， IGF2R的表達在雌性肝臟組織中最高，IGFBP1、2的表達在雄性肝臟組織中最高， IGFBP3、7在雌性垂體表達量最高，IGFBP5在雄性垂體表達最高。這說明IGFBP家族不同成員可能對IGF系統(tǒng)的調(diào)控作用不同，而且參

5、與魚類生長與性腺發(fā)育。
　　3.性激素處理對黃顙魚IGF1R及IGFBP3在性腺表達的影響
　　經(jīng)雌激素EE2處理后，IGF1R在精巢0-72 h內(nèi)的表達整體是呈升高趨勢。IGFBP3在精巢0-72 h內(nèi)的表達短時間內(nèi)增加后迅速趨于下降。經(jīng)雄激素MT處理后IGF1R在卵巢0-72h內(nèi)先微弱上升而后顯著下降，最后又有所回升。而IGFBP3在卵巢0-72 h內(nèi)呈先降低而后逐漸升高，最后又恢復至處理前表達水平的結(jié)果。這說明IGF信