坤寶顆粒治療更年期綜合征的藥理作用及機(jī)制研究.pdf

1、更年期綜合征是指女性在絕經(jīng)期前后(一般發(fā)生于45-52歲之間)，因卵巢功能退行性衰退，體內(nèi)分泌的雌激素水平明顯下降而導(dǎo)致的心血管、神經(jīng)、內(nèi)分泌系統(tǒng)功能紊亂，臨床表現(xiàn)有功能性子宮出血、陣發(fā)性潮熱和出汗，外陰和陰道萎縮、骨質(zhì)疏松等癥狀及出現(xiàn)精神和植物神經(jīng)系統(tǒng)的癥狀。隨著我國人口結(jié)構(gòu)不斷的老齡化，該病有發(fā)病年齡提早、發(fā)病率上升的趨勢(shì)，嚴(yán)重影響了占婦女一生中三分之一時(shí)間的圍絕經(jīng)期及絕經(jīng)后期的健康問題和生活質(zhì)量。 目的 通過觀察坤

2、寶顆粒對(duì)自然衰老大鼠及擬更年期綜合征模型動(dòng)物的自主活動(dòng)、血中性激素水平、相關(guān)器官重量、性器官組織形態(tài)、腦組織去甲腎上腺素、5-羥色胺等神經(jīng)遞質(zhì)含量的影響，探討坤寶顆粒治療女性更年期綜合征的藥理作用及機(jī)理。 方法與結(jié)果 第一部分坤寶顆粒對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)的藥理作用研究 1．對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)自主活動(dòng)的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(1.62g生藥/kg，0.81g生藥/kg，0.41g生藥/kg

3、)連續(xù)給藥23天，通過曠場(chǎng)試驗(yàn)觀察準(zhǔn)老年對(duì)照組和各個(gè)給藥組動(dòng)物被放入箱內(nèi)3分鐘所走的格子數(shù)(以四肢走到同一格內(nèi)為活動(dòng)一次)及站立修飾次數(shù)。與準(zhǔn)老年對(duì)照組比較，坤寶顆粒能明顯減少自然衰老大鼠活動(dòng)中站立張望修飾次數(shù)。 2．對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)記憶功能的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(1.62g生藥/kg，0.81g生藥/kg，0.41g生藥/kg)連續(xù)給藥26天，通過避暗試驗(yàn)觀察準(zhǔn)老年對(duì)照組和各個(gè)給藥組動(dòng)物進(jìn)入暗室的潛伏期和

4、3分鐘內(nèi)遭電擊的次數(shù)。與準(zhǔn)老年對(duì)照組比較，坤寶顆粒0.81g生藥/kg、0.41g生藥/kg劑量，可延長衰老大鼠進(jìn)入暗室的潛伏期，減少錯(cuò)誤次數(shù)。 3．對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)血中激素水平、性器官及腎上腺重量的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(1.62g生藥/kg，0.81g生藥/kg，0.41g生藥/kg)連續(xù)給藥28天，于末次給藥1小時(shí)后用放射免疫法測(cè)血清中雌二醇和孕酮的含量。并取動(dòng)物的卵巢、子宮、腎上腺，稱臟器濕重，計(jì)算臟

5、器系數(shù)。與準(zhǔn)老年對(duì)照組比較，坤寶顆粒能提高大鼠血清中雌二醇含量；對(duì)大鼠血清中孕酮的含量有不同程度的提高，中劑量效果較顯著；對(duì)衰老大鼠的子宮、卵巢、腎上腺的臟器系數(shù)均有不同程度的增加。 4．對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)腦內(nèi)兒茶酚胺含量的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(1.62g生藥/kg，0.81g生藥/kg，0.41g生藥/kg)連續(xù)給藥28天，用HPLC法測(cè)定腦組織中的5-羥色胺(5-HT)、多巴胺(DA)、去甲腎上腺素(NE

6、)的含量。與準(zhǔn)老年對(duì)照組比較，坤寶顆粒對(duì)衰老大鼠腦皮層中的去甲腎上腺素(NE)有明顯升高作用；坤寶顆粒對(duì)腦組織中多巴胺(DA)、和5-羥色胺(5-HT)含量無明顯的影響。 5．對(duì)自然衰老大鼠(準(zhǔn)老年大鼠)性器官組織形態(tài)學(xué)的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(1.62g生藥/kg，0.81g生藥/kg，0.41g生藥/kg)連續(xù)給藥28天，觀察卵巢的組織學(xué)形態(tài)，進(jìn)行黃體、各發(fā)育不同階段的卵泡計(jì)數(shù)；觀察子宮的組織學(xué)形態(tài)，進(jìn)行子宮橫切面子

7、宮腺泡計(jì)數(shù)，測(cè)量子宮內(nèi)膜厚度。與準(zhǔn)老年對(duì)照組比較，坤寶顆粒大劑量組能夠促進(jìn)衰老大鼠卵巢中的卵泡和黃體發(fā)育，增加卵泡中的卵泡數(shù)和黃體數(shù)；并且能夠增加衰老大鼠子宮腺泡數(shù)量，增加子宮內(nèi)膜厚度。 第二部分坤寶顆粒對(duì)去勢(shì)疊加應(yīng)激刺激模型小鼠的藥理作用研究 1．對(duì)去勢(shì)疊加應(yīng)激刺激模型小鼠戊巴比妥鈉閾下催眠劑量的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.32g生藥/kg，1.16g生藥/kg，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥11天，末次給藥5

8、0分鐘后，模型組、給藥組、空白組動(dòng)物腹腔注射戊巴比妥鈉30mg/kg，以給藥后15分鐘內(nèi)小鼠翻正反射消失達(dá)1分鐘以上作為入睡指標(biāo)，記錄睡眠動(dòng)物個(gè)數(shù)。與模型對(duì)照組比較，坤寶顆粒對(duì)戊巴比妥鈉閾下催眠劑量有一定的協(xié)同作用，增加小鼠入睡個(gè)數(shù)，睡眠百分率均達(dá)到50％以上。 2．對(duì)去勢(shì)疊加應(yīng)激刺激模型小鼠延長戊巴比妥鈉催眠時(shí)間的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.32g生藥/kg，1.16g生藥/kg，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥11天，

9、末次給藥1小時(shí)后，腹腔注射戊巴比妥鈉35mg/kg，觀察小鼠睡眠潛伏期和維持時(shí)間。可不同程度地縮短去勢(shì)小鼠的睡眠潛伏期，延長去勢(shì)小鼠的睡眠時(shí)間。 3．對(duì)去勢(shì)疊加應(yīng)激刺激模型小鼠血中激素水平的影響：分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.32g生藥/kg，1.16g生藥/kg，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥15天，末次給藥1小時(shí)后，用放射免疫法測(cè)定去勢(shì)小鼠血清中雌二醇和孕酮的含量。坤寶顆粒對(duì)小鼠血清中雌二醇及孕酮含量未見明顯影響。

10、第三部分坤寶顆粒對(duì)鹽酸嗎啡引起舉尾反應(yīng)的影響分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.32g生藥/kg，1.16g生藥/kg，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥8天，末次給藥1小時(shí)后，各組小鼠肌內(nèi)注射鹽酸嗎啡20mg/kg，觀察小鼠由興奮、緊張引起的豎尾反應(yīng)潛伏期。與空白對(duì)照組比較，坤寶顆粒各劑量組均能延長嗎啡引起的豎尾反應(yīng)潛伏期。 第四部分坤寶顆粒對(duì)記憶功能的作用研究1．對(duì)小鼠學(xué)習(xí)和記憶獲得障礙的影響一水迷宮法：分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.

11、32g生藥/kg，1.16g生藥/kg，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥10天，于末次給藥1小時(shí)后，除空白對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物均腹腔注射東莨菪堿溶液5mg/kg，觀察小鼠從水迷宮記錄儀起點(diǎn)至終點(diǎn)登臺(tái)的時(shí)間，記錄走錯(cuò)誤路線的次數(shù)。與模型對(duì)照組比較，坤寶顆粒大劑量，可縮短模型小鼠上岸時(shí)間；各劑量組均能減少模型小鼠錯(cuò)誤次數(shù)。 2．小鼠學(xué)習(xí)和記憶獲得障礙的影響一避暗法：分別以大、中、小三個(gè)劑量(2.32g生藥/kg，1.16g生藥/kg

12、，0.58g生藥/kg)連續(xù)給藥7天，于末次給藥小時(shí)后，除空白對(duì)照組外，其余各組動(dòng)物均腹腔注射樟柳堿10mg/kg，記錄3分鐘內(nèi)小鼠潛伏期和錯(cuò)誤次數(shù)。與模型對(duì)照組比較，坤寶顆粒各劑量組均可延長小鼠進(jìn)入暗室的潛伏期，減少錯(cuò)誤次數(shù)。 結(jié)論 坤寶顆粒對(duì)自然衰老大鼠有一定的鎮(zhèn)靜作用和改善記憶的作用；能夠明顯增加自然衰老大鼠血中雌激素的水平；改善由于植物神經(jīng)系統(tǒng)功能紊亂出現(xiàn)的失眠健忘、焦慮等癥狀；對(duì)自然衰老大鼠性器官組織形態(tài)學(xué)有一

13、定的改善作用。實(shí)驗(yàn)中坤寶顆粒對(duì)自然衰老大鼠腦組織中的去甲腎上腺素(NE)有明顯升高作用，且具有較好的量效關(guān)系；而對(duì)腦組織中多巴胺(DA)、和5-羥色胺(5-HT)含量則沒有明顯的影響。根據(jù)上述實(shí)驗(yàn)結(jié)果，分析推斷坤寶顆粒治療更年期綜合征可能是通過升高血清中雌二醇和孕酮含量，改善由于激素分泌而引起的內(nèi)分泌失調(diào)和植物神經(jīng)紊亂的綜合癥狀，減少由于緊張引起的活動(dòng)次數(shù)的增加，改善記憶功能和睡眠功能，延緩卵巢的衰老，諸多因素共同調(diào)節(jié)機(jī)體功能，提高更年