整合素α5β1介導的信號轉(zhuǎn)導通路對K562細胞增殖和凋亡的影響.pdf

1、目的：慢性粒細胞白血病(chronicmyeloidleukemia，CML)是一種常見的惡性血液病，90％以上的CML患者體內(nèi)存在特征性染色體異常，即費城染色體陽性(ph+)，形成bcr/abl融合基因，轉(zhuǎn)錄、合成bcr/abl融合基因產(chǎn)物BCR/ABL(P210)融合蛋白。由于P210融合蛋白具有很強的酪氨酸激酶活性，可激活CMLph+細胞內(nèi)某些異常信號轉(zhuǎn)導通路，并抑制細胞內(nèi)正常信號的傳遞，從而導致ph+細胞異常增殖并逃避凋亡。

2、 整合素屬于粘附分子家族，是一類重要的細胞表面受體，主要介導細胞與細胞外基質(zhì)(extracellularmatrix，ECM)之間的粘附，參與細胞的各種生理功能，如細胞的生長、發(fā)育、分化和凋亡等。粘著斑激酶(focaladhesionkinase，F(xiàn)AK)是整合素信號途徑中連接整合素與下游信號分子的媒介，是胞內(nèi)多個信號途徑的交匯點。以FAK為中心的整合素信號轉(zhuǎn)導通路除了ras-MAPK信號途徑外，還有磷脂酰肌醇-3激酶(phosph

3、atidylinositol3-kinase，PI3K)和蛋白激酶B即AKT(serine/threonrinekinase，AKT)信號分子的參與。這些信號分子被激活后可參與多種病理過程，在腫瘤的轉(zhuǎn)移、浸潤、血管形成及細胞增殖和凋亡中起重要作用。腫瘤發(fā)生時，腫瘤細胞表面整合素的表達、結(jié)構(gòu)或功能及其介導的信號轉(zhuǎn)導過程常出現(xiàn)異常改變，即整合素介導的正常信號傳導過程受到抑制，而異常信號轉(zhuǎn)導通路被激活，從而促使腫瘤細胞異常增殖和逃避凋亡。既往

4、研究表明，應用抗整合素單克隆抗體阻斷異常信號轉(zhuǎn)導通路，可抑制實體瘤細胞的增殖并誘導其凋亡。 研究證實，整合素β1亞家族表達于大多數(shù)骨髓CD34+細胞上，并在CMLph+細胞上過表達，但由于其介導的粘附和增殖抑制功能存在缺陷，使CMLph+細胞異常增殖和歸巢能力顯著下降。大量證實表明，CML祖細胞(ph+細胞)中的P210融合蛋白由于自身的酪氨酸激酶活性明顯增高，使胞內(nèi)多種底物蛋白發(fā)生磷酸化激活，進而借助胞漿信號分子的“瀑布”式效

5、應傳遞生物學信號，通過ras-MAPK或PI3K-AKT信號途徑上調(diào)核內(nèi)某些基因的表達，促使細胞發(fā)生白血病轉(zhuǎn)化、異常增殖和凋亡受抑。這種異常信號轉(zhuǎn)導過程可能是通過整合素介導的，在CML的發(fā)病機制中發(fā)揮重要作用。 干擾素(Interferon，IFN)是臨床上治療CML的有效藥物之一。研究發(fā)現(xiàn)，IFN通過增加具有正常功能的FAK蛋白比例糾正整合素β1的功能缺陷而恢復其對CML細胞的粘附和增殖抑制作用。IFN是否同時抑制了整合素β1

6、介導的異常信號轉(zhuǎn)導通路，目前尚不十分清楚。由于K562細胞和CML患者骨髓單個核細胞均存在特征性P210融合蛋白。為了進一步闡明整合素信號轉(zhuǎn)導通路的功能狀態(tài)與CML發(fā)病機制之間的關系，本研究以CML急變期細胞系K562細胞株為研究對象，通過觀察阻斷整合素α5β1介導的信號轉(zhuǎn)導通路對K562細胞增殖、凋亡及細胞周期的影響，并檢測通路中關鍵分子的基因和蛋白表達水平的變化，力求解決如下問題：整合素介導的哪些信號轉(zhuǎn)導通路參與了CML的發(fā)病機制?