杭州市若干漁業(yè)水域中大腸桿菌耐藥性調(diào)查與分析.pdf

1、為了解漁業(yè)水域大腸桿菌耐藥性現(xiàn)狀，有利于水產(chǎn)品質(zhì)量安全保障，本研究開展了對杭州市若干漁業(yè)水域中大腸桿菌耐藥性調(diào)查與分析，主要內(nèi)容包括漁業(yè)水域大腸桿菌分離鑒定、耐藥性分析、耐藥基因檢測等方面的研究:
　　1.按產(chǎn)卵索餌場、增殖放流區(qū)、種質(zhì)保護(hù)區(qū)和養(yǎng)殖區(qū)四類監(jiān)測區(qū)域，在杭州市轄區(qū)范圍內(nèi)布設(shè)站點(diǎn)45個(gè)，采樣層次為:水質(zhì)項(xiàng)目水深≤10m，采表層;水深＞10m，采表底兩層。通過形態(tài)學(xué)鑒定、選擇性培養(yǎng)基和PCR鑒定等方法從50個(gè)水質(zhì)樣品中分離

2、鑒定得到12株大腸桿菌。本試驗(yàn)的大腸桿菌PCR鑒定方法可用于臨床送檢的水質(zhì)樣品及其他病料中的大腸桿菌快速鑒定。
　　2.本試驗(yàn)采用K-B法測定了18種常用抗菌藥物對分離自杭州市部分漁業(yè)水域的大腸桿菌的抑菌圈直徑，判定受試菌株對18種抗菌藥物的耐藥性，樣品中大腸桿菌對部分抗菌藥物呈現(xiàn)出明顯的耐藥性，分別為苯唑青霉素100％、新霉素100％、多粘菌素B91.7％、復(fù)方新諾明41.7％。此外氨芐青霉素8.3％、氯霉素41.7％、強(qiáng)力霉素

3、16.7％、諾氟沙星8.3％、環(huán)丙沙星8.3％、恩諾沙星8.3％、呋喃唑酮8.3％、壯觀霉素8.3％、青霉素G100％;而對另一些抗菌藥物敏感性很高，包括先鋒氨噻肟100％、鏈霉素100％、丁胺卡那100％、慶大霉素100％、諾氟沙星91.7％、氧氟沙星91.7％、壯觀霉素91.7％、強(qiáng)力霉素83.3％、呋喃唑酮83.3％、氨芐青霉素75％。大腸桿菌分離株對一種或多種抗菌藥物耐藥，其中3株對4種抗菌藥物耐藥，7株對5種抗菌藥物耐藥，1株

4、對8種抗菌藥物耐藥，1株對11種抗菌藥物耐藥。對5種抗菌藥物耐藥的菌株數(shù)目最多，所占比例最大，達(dá)到58.3％，其次是對4種抗菌藥物耐藥的菌株，所占比例為25％，對8種及11種抗菌藥物耐藥的菌株所占比例均為8.3％。
　　3.經(jīng)PCR和瓊脂糖凝膠電泳分析，12株大腸桿菌分離株中大部分含有2～4種耐藥基因，含耐藥基因最多的達(dá)到6種;應(yīng)用12對引物，共擴(kuò)增到10種耐藥基因，檢出率最高的為β-內(nèi)酰胺類耐藥基因SHV和氨基糖苷類耐藥基因aa

5、dA1，達(dá)到了58.3％(7/12)，氯霉素類耐藥基因cat2，也達(dá)到了較高的33.3％(4/12)。對測得的耐藥表型和耐藥基因型進(jìn)行比較，發(fā)現(xiàn)12株大腸桿菌對β-內(nèi)酰胺類、氨基糖苷類、磺胺類、四環(huán)素類和氯霉素類藥物的藥敏試驗(yàn)結(jié)果與耐藥基因型的檢測結(jié)果有較高的一致性，符合率分別為75％、83.3％、80％、100％和100％。
　　綜上所述，杭州市部分漁業(yè)水域的大腸桿菌分離株對青霉素、苯唑青霉素、新霉素及多粘菌素B的耐藥率已經(jīng)超過