心臟肥大細(xì)胞及TLR4在小鼠病毒性心肌炎發(fā)病機(jī)制中的作用.pdf

1、目的:探討肥大細(xì)胞及TLR4在病毒性心肌炎發(fā)病及發(fā)展過(guò)程中的作用及其作用機(jī)制。
　　方法:以柯薩奇病毒B3腹腔注射BALB/C小鼠制作病毒性心肌炎模型(模型組，n=24)，不含病毒的Eagle's病毒稀釋液腹腔注射BALB/C小鼠作為對(duì)照組（n=24），觀察兩組小鼠的一般情況變化，分別于制模后7天、14天、28天取心肌組織，行HE染色、Masson染色及透射電鏡觀察兩組小鼠心肌病理改變情況，以甲苯胺藍(lán)染色法和透射電鏡檢測(cè)兩組小鼠各

2、時(shí)間點(diǎn)心肌肥大細(xì)胞數(shù)目及脫顆粒情況，用RT-PCR及免疫組化法檢測(cè)小鼠心肌TLR4的表達(dá)，將模型組各時(shí)間點(diǎn)肥大細(xì)胞數(shù)目與TLR4 mRNA表達(dá)進(jìn)行相關(guān)性分析。
　　結(jié)果:1.病毒性心肌炎小鼠模型建立:小鼠腹腔注射CVB3后，出現(xiàn)掉毛、體重減輕等一般情況改變;HE染色顯示心肌水腫、炎性細(xì)胞浸潤(rùn)明顯，各時(shí)間點(diǎn)病理積分較對(duì)照組明顯增高（P＜0.05）;Masson染色:模型組第28天心肌血管周圍及心肌間質(zhì)內(nèi)大量藍(lán)色膠原沉積，膠原容積分?jǐn)?shù)

3、增加，與第7天、第14天模型組及對(duì)照組比較差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(all P＜0.05)。透射電鏡下觀察，模型組心肌排列紊亂，心肌細(xì)胞核變形。
　　2.肥大細(xì)胞數(shù)目及形態(tài):甲苯胺藍(lán)染色顯示模型組各時(shí)間點(diǎn)心肌肥大細(xì)胞數(shù)目較對(duì)照組明顯增多，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05);透射電鏡下可見(jiàn)模型組肥大細(xì)胞脫顆粒明顯。
　　3.TLR4表達(dá):免疫組化及RT-PCR結(jié)果顯示模型組各時(shí)間點(diǎn)心肌TLR4的陽(yáng)性表達(dá)面積及mRNA表達(dá)均高于對(duì)照組相