新型組蛋白去乙?；敢种苿┑脑O(shè)計(jì)與合成.pdf

1、組蛋白去乙?；负徒M蛋白乙酰轉(zhuǎn)移酶在基因表達(dá)和染色體形成等方面起著重要的調(diào)節(jié)作用。研究表明，組蛋白去乙酰化酶(HDAC)的異常導(dǎo)致組蛋白乙?；降漠惓＃@與癌癥的發(fā)生和發(fā)展有密切的關(guān)系。組蛋白去乙酰化酶抑制劑(HDACi)能夠抑制HDAC去乙?；钚?，誘導(dǎo)組蛋白乙?；?，從而阻滯腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)、誘導(dǎo)細(xì)胞分化和凋亡。因此，以組蛋白去乙?；笧榘悬c(diǎn)，設(shè)計(jì)合成抗腫瘤藥物具有廣闊的前景。在臨床前研究中，己發(fā)現(xiàn)很多種類(lèi)的HDACi具有很強(qiáng)的抗癌活性

2、和腫瘤特異性。另外在早期臨床試驗(yàn)中有些HDACi顯示出對(duì)血液系統(tǒng)惡性腫瘤治療的潛力，諸如皮膚T-細(xì)胞淋巴瘤，骨髓增生異常綜合癥和彌漫性B細(xì)胞淋巴瘤等等。辛二酰苯胺異羥肟酸(Subereyl anlide hydroxamicacid，SAHA)是第一個(gè)上市的用于治療癌癥的HDACi。
　　 本課題組以前利用“點(diǎn)擊化學(xué)”設(shè)計(jì)合成了一系列新型的HDACi，經(jīng)體外酶活測(cè)試，篩選出與SAHA(IC50=67 nM)活性相當(dāng)?shù)南葘?dǎo)化合物N

3、SC746457(IC50=104 nM)。本課題將傳統(tǒng)的藥物設(shè)計(jì)和計(jì)算機(jī)輔助藥物設(shè)計(jì)相結(jié)合，以簡(jiǎn)化衍生物的合成方法和提高化合物的成藥為為目標(biāo)，對(duì)先導(dǎo)化合物NSC746457進(jìn)行兩輪結(jié)構(gòu)優(yōu)化。
　　 第一輪優(yōu)化基于HDAC2-TSA的晶體結(jié)構(gòu)對(duì)NSC746457進(jìn)行優(yōu)化。將NSC746457對(duì)接到HDAC2的活性區(qū)域，通過(guò)對(duì)比HDAC2-TSA晶體結(jié)構(gòu)和HDAC2-NSC746457對(duì)接結(jié)構(gòu)，表明位于帽子結(jié)合域一側(cè)的疏水性氨基酸

4、殘基Phe210可與TSA的甲基之間存在疏水作用，而NSC746457與HDAC2的Phe210之間卻沒(méi)有此疏水作用。因此，在NSC746457的亞甲基上引入不同疏水性取代基，以期增加與Phe210的疏水性作用，從而增強(qiáng)化合物抑制HDACs的活性。共合成了16個(gè)化合物，通過(guò)體外酶活測(cè)試篩選出兩個(gè)活性較好的化合物：異丙基取代物(IC50=22 nM)和叔丁基取代物(IC50=18 nM)。
　　 第二輪先導(dǎo)化合物的優(yōu)化包括用2-取

5、代的苯并雜環(huán)取代先導(dǎo)化合物NSC746457中的反式.苯乙烯結(jié)構(gòu)和在亞甲基上引入取代基，同時(shí)對(duì)最佳活性化合物進(jìn)行了手性合成，共合成了14個(gè)化合物。通過(guò)體外酶活測(cè)試和細(xì)胞活性測(cè)試，篩選出手性先導(dǎo)化合物(E)-3-(1-((S)-1-(苯并噁唑-2-基)-2-甲基丙基)-1H-1，2，3-三氮唑-4-基)羥基丙烯酰胺(12，NK-HDAC-1)，其活性比SAHA好一個(gè)數(shù)量級(jí)，對(duì)HDACs的抑制活性為IC50=7nM，對(duì)56個(gè)癌細(xì)胞的抑制活性