某些中藥活性組分與蛋白質(zhì)相互作用研究.pdf

1、人血清白蛋白(Human serm albumin，HSA)是循壞系統(tǒng)中可溶性蛋白質(zhì)的重要組成部分，是血漿中含量最豐富的蛋白質(zhì)，具有很多生理學(xué)上的功能。它可以同許多內(nèi)源及外源性物質(zhì)結(jié)合，在體內(nèi)起著存儲和轉(zhuǎn)運作用。蛋白質(zhì)與藥物的相互作用影響藥物在體內(nèi)的分布、代謝及排泄方式。藥物與蛋白質(zhì)相互作用的研究可為探討人類疾病機制，診斷、預(yù)防疾病，制藥和新藥開發(fā)提供重要的理論基礎(chǔ)，是毒理學(xué)、生命科學(xué)、化學(xué)及臨床醫(yī)學(xué)的一個重要研究領(lǐng)域。基于研究有機小分

2、子和蛋白質(zhì)的相互作用具有重要的意義，本論文在總結(jié)前人工作的基礎(chǔ)上，綜合各種實驗技術(shù)及化學(xué)信息學(xué)，進行了以下幾方面的創(chuàng)新性研究： (1)研究了四種中藥活性組分葛根素、和厚樸酚、丹參酮IIA、甲基橙皮苷及殺菌劑甲基硫菌靈與人血清白蛋白的相互作用。 (2)根據(jù)Stern-Volmer方程和Scatchard方程研究了上述小分子與HSA結(jié)合的作用機理，測定了結(jié)合常數(shù)、結(jié)合位點數(shù)，確定了結(jié)合部位和主要作用力類型。 (3)用

3、計算機分子模擬方法研究了以上小分子與HSA的對接，獲得與實驗一致的結(jié)果。 (4)利用圓二色譜和傅里葉變換紅外光譜考察了上述小分子對HSA二級結(jié)構(gòu)的影響，獲得了作用前后HSA二級結(jié)構(gòu)含量的變化值。 論文共分為七部分： 第一章：簡要介紹了蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)、功能和性質(zhì)；綜述了藥物與蛋白質(zhì)相互作用的研究方法、研究內(nèi)容及研究進展。 第二章：用熒光光譜法、紅外光譜法、圓二色譜法及對接技術(shù)對葛根素和人血清白蛋白的相互作用進

4、行了詳細的研究。結(jié)果表明，葛根素與蛋白質(zhì)之間有很強的結(jié)合，結(jié)合后蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)發(fā)生了輕微的改變。分子對接研究表明葛根素和蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域位于蛋白質(zhì)的亞結(jié)構(gòu)域IIA中，主要通過疏水作用和氫鍵作用結(jié)合，這和鍵合模式所得到的結(jié)果是一致的。 第三章：應(yīng)用多種光譜方法和對接技術(shù)對和厚樸酚和人血清白蛋白的相互作用進行了詳細的研究。熒光偏振結(jié)果表明和厚樸酚與蛋白質(zhì)之間的強結(jié)合改變了蛋白質(zhì)的微環(huán)境。圓二色譜和紅外光譜實驗結(jié)果說明了二者之間的結(jié)

5、合改變了蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。分子對接研究表明了和厚樸酚和蛋白質(zhì)的結(jié)合區(qū)域位于蛋白質(zhì)的亞結(jié)構(gòu)域IIA中，主要通過疏水作用結(jié)合，同時還存在著氫鍵和靜電作用。 第四章：本章研究了模擬生理條件下中藥活性組分丹參酮IIA與人血清白蛋白的相互作用情況。利用熒光猝滅方法、CD和FTIR技術(shù)確定了反應(yīng)的結(jié)合常數(shù)、主要作用力類型以及丹參酮IIA對蛋白質(zhì)二級結(jié)構(gòu)的影響；熱力學(xué)及分子對接結(jié)果表明丹參酮IIA與人血清白蛋白的位置I即亞結(jié)構(gòu)域IIA結(jié)合，二

6、者之間存在較強的疏水作用，同時還存在氫鍵作用。 第五章：利用多種方法研究了模擬生理條件下甲基橙皮苷與人血清白蛋白的相互作用。結(jié)果表明，甲基橙皮苷與蛋白質(zhì)之間有很強的結(jié)合并改變了蛋白質(zhì)的二級結(jié)構(gòu)。鍵合模式的結(jié)果表明二者之間的結(jié)合以疏水作用為主，同時還伴隨著氫鍵作用。利用Forster能量轉(zhuǎn)移理論，求得甲基橙皮苷與血清白蛋白間的距離距離r小于7nm，說明發(fā)生了能量轉(zhuǎn)移。 第六章：應(yīng)用熒光方法在模擬人體生理條件下研究了不同溫度