亞慢性過量氟暴露對大鼠骨中SPARC表達(dá)的影響.pdf

1、前言: 由于地殼中氟的分布不均衡，使一些環(huán)境中氟元素水平過高，如果人體長期暴露在這種高氟環(huán)境下，從外界獲得的氟將會超過正常生理需要，使體液和組織中氟離子的濃度增高，就會導(dǎo)致全身慢性中毒性病變，稱為地方性氟中毒(簡稱地氟病)。天然高氟地區(qū)呈世界性廣泛分布，全球已有50多個國家和地區(qū)報道地方性氟中毒的存在，而我國受地方性氟中毒的危害最為嚴(yán)重。地氟病已經(jīng)成為威脅我國勞動人民，尤其是貧困地區(qū)人民健康的重大公共衛(wèi)生問題。地氟病對機體的損害

2、主要可分為骨相損害和非骨相損害，其中以骨相損害為重，臨床主要表現(xiàn)為氟骨癥和氟斑牙。氟骨癥可嚴(yán)重危害人類健康，其病理表現(xiàn)多種多樣?；镜牟±肀憩F(xiàn)是成骨細(xì)胞和破骨細(xì)胞增生均較活躍，而骨轉(zhuǎn)換加速則尤為明顯。 SPARC即富含半胱氨酸的酸性分泌蛋白，作為成骨細(xì)胞產(chǎn)物中的幾種主要的骨細(xì)胞外基質(zhì)非膠原蛋白之一，也作為一種鈣結(jié)合蛋白，可以與膠原蛋白和羥磷灰石結(jié)合調(diào)節(jié)細(xì)胞與基質(zhì)相互作用，從而調(diào)節(jié)礦化，同時，還可以結(jié)合某些細(xì)胞因子，從而調(diào)節(jié)骨再建

3、過程。已有研究發(fā)現(xiàn)，SPARC與某些腫瘤的骨轉(zhuǎn)移有關(guān)，故認(rèn)為SPARC與骨代謝有關(guān)。過量氟又可干擾骨代謝，推測SPARC可能在氟骨癥發(fā)生中起一定作用。通過查閱國內(nèi)外文獻(xiàn)發(fā)現(xiàn)，目前，有關(guān)SPARC與腫瘤骨轉(zhuǎn)移的研究報告比較多，尚未見到關(guān)于SPARC與慢性氟中毒關(guān)系的研究報道?；谝陨险J(rèn)識，本次研究將SPARC與慢性氟中毒發(fā)生時骨質(zhì)改變的關(guān)系作為研究重點，主要從SPARC與慢性氟中毒關(guān)系上入手，探討亞慢性過量氟暴露對大鼠骨中SPARC表達(dá)的

4、影響，旨在從分子水平深化對于氟骨癥發(fā)生機理的認(rèn)識，為進(jìn)一步研究氟骨癥發(fā)病機制提供新線索。 材料與方法: 由中國醫(yī)科大學(xué)實驗動物中心購入離乳1周的雄性Wistar大鼠60只，體重80±10g，適應(yīng)性飼養(yǎng)1周后，按體重均衡原則隨機分為4組，每組15只。具體分組情況如下：對照組(飲自來水)、低氟組(飲水含氟50mgF/L)、中氟組(飲水含氟100mg F/L)、高氟組(飲水含氟150mg F/L)。 血清和尿液中氟離子

5、含量采用氟離子選擇電極法測定。骨中氟離子含量采用管式爐高溫燃燒水解法-氟離子選擇電極法測定。骨中SPARC含量采用免疫組化染色及顯微圖像分析測定。將大鼠脛骨樣品經(jīng)過固定、脫鈣、脫水、石蠟包埋、切片處理后進(jìn)行HE染色以及免疫組化染色。其切片在光鏡下觀察，并拍照進(jìn)行圖像分析。實驗所得數(shù)據(jù)以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差(-X±S)表示，采用SPSS13.0軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析處理，進(jìn)行不同染氟時間和不同處理組間各變量的比較。檢驗水準(zhǔn)取α=0.05。 結(jié)

6、果: 實驗期間，各染氟組大鼠均出現(xiàn)不同程度的氟斑牙表現(xiàn)，而且隨著染氟劑量的升高和染氟時間的延長，氟斑牙損傷程度加重。由于原始數(shù)據(jù)分布不符合正態(tài)分布，首先分別進(jìn)行對數(shù)轉(zhuǎn)換，轉(zhuǎn)換后的數(shù)據(jù)符合正態(tài)分布且方差齊。各組數(shù)據(jù)經(jīng)單因素方差分析以及兩兩比較的結(jié)果如下：本次實驗測得的血清氟、尿氟、骨氟水平發(fā)現(xiàn)，各實驗組大鼠氟水平均隨染氟劑量的增加而升高，隨染氟時間的延長而增加。 本次研究發(fā)現(xiàn)，骨組織中SPARC的表達(dá)水平在不同時間對照組和

7、中氟組大鼠中表達(dá)差別有統(tǒng)計學(xué)意義，隨時間的延長而呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢。在3月末，各處理組間與對照組比較差別也有統(tǒng)計學(xué)意義，即隨著染氟劑量的升高SPARC的表達(dá)水平呈先下降后上升的趨勢，在中氟組降至最低，高氟組又回升。 結(jié)論: 骨組織中SPARC的表達(dá)水平在不同時間對照組和中氟組大鼠骨組織中表達(dá)有差別，隨時間的延長而呈現(xiàn)先升高后下降的趨勢。在3月末，各處理組間比較差別也有統(tǒng)計學(xué)意義，即隨著染氟劑量的升高SPARC的表達(dá)水