中國明對蝦和凡納濱對蝦凝集素的分離純化及性質研究.pdf

1、對蝦是我國重要的海水養(yǎng)殖經濟動物，但是其發(fā)展深受病害的影響，為進行病害防治及遺傳育種等研究，對于對蝦免疫機理的研究成為迫切的需要。解決大規(guī)模對蝦疾病的根本途徑是尋找免疫刺激劑提高對蝦自身免疫力，而其前提是對蝦免疫機理的研究。本文對對蝦血清中的模式識別蛋白——凝集素進行了分離純化和性質測定。 本項研究利用3種不同物質：N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)，胎球蛋白(Fetuin)和小牛粘液素(BSM)為配基，分別與三種柱材料結合進行親

2、和層析，從中國明對蝦血淋巴中純化凝集素。這三種親和層析均得到一種相同的凝集素FCL-1，經SDS/PAGE證明FCL-1分子量為168kDa。利用新鮮小鼠血細胞進行分離純化同樣獲得了這種凝集素。同時對FCL-1的各種性質進行了研究，F(xiàn)CL-1能夠與人的A、B、O型血細胞，以及小鼠、雞血細胞相結合；與乙酰基糖類和唾液酸類糖蛋白均具有較強的結合特性；當溫度超過75℃時，生物活性消失，最適pH為7-11；對Ca2+具有依賴性，對EDTA極為敏

3、感；能夠引起胃癌和肝癌細胞的輕微凝集；對鰻弧菌等魚蝦類致病菌具有較強的結合特性。肽指紋質量圖譜顯示這是一種新的蛋白質。 同樣利用胎球蛋白(Fetuin)親和層析從凡納濱對蝦中(俗稱南美白對蝦)純化了另一種凝集素LVL，它能夠使人的A、B、O型血細胞及雞血細胞凝集，它的生物活性依賴于Ca2+。LVL是由兩個分別為32KD和38KD的亞基構成的分子量為172KD的蛋白質。它的最適pH為7-11，當溫度超過75℃時，生物活性消失。與多