創(chuàng)傷性腦損傷神經(jīng)細(xì)胞凋亡及其相關(guān)基因Bcl-2及Fas表達(dá)的實(shí)驗(yàn)性研究.pdf

1、為了進(jìn)一步闡明細(xì)胞凋亡在創(chuàng)傷性腦損傷中的作用與地位,探討凋亡相關(guān)基因Bcl-2(B-cell lympomna/leukemia-2)和Fas在腦挫傷后神經(jīng)細(xì)胞凋亡中的調(diào)控機(jī)制,同時(shí)評(píng)價(jià)創(chuàng)傷性腦損傷后神經(jīng)細(xì)胞Bcl-2和Fas蛋白表達(dá)與早期腦損傷時(shí)間推斷的應(yīng)用價(jià)值,該課題對(duì)中度大鼠腦挫傷模型進(jìn)行更深入地研究.該課題選用成年Wistar大鼠,采用改進(jìn)的Edward自由落體撞擊儀復(fù)制中度腦挫傷模型,通過(guò)常規(guī)蘇木素-伊紅染色技術(shù)(hemato

2、xylin and eosin,HE)對(duì)大鼠中度腦挫傷后12小時(shí)內(nèi)繼發(fā)性腦損傷的病理學(xué)改變、神經(jīng)細(xì)胞凋亡的時(shí)序空間分布特征進(jìn)行光鏡觀察,同時(shí)運(yùn)用免疫組織化學(xué)鏈霉素抗生物素蛋白過(guò)氧化酶連接法(Streptavidin Peroxidase Conjunction Method,SP),并結(jié)合計(jì)算機(jī)圖象分析技術(shù)對(duì)凋亡相關(guān)基因Bcl-2及Fas蛋白表達(dá)變化的規(guī)律與腦損傷時(shí)間的關(guān)系進(jìn)行定量分析.結(jié)果表明:創(chuàng)傷性腦損后存在神經(jīng)細(xì)胞壞死和凋亡兩種方

3、式,其中凋亡是遲發(fā)性神經(jīng)細(xì)胞死亡的主要形式.腦挫傷可以快速激活凋亡相關(guān)基因Bcl-2與Fas的表達(dá),促使其參與神經(jīng)細(xì)胞凋亡的調(diào)控,但神經(jīng)細(xì)胞是否發(fā)生凋亡則取決于促凋亡與抑凋亡基因之間復(fù)雜的調(diào)控機(jī)制.腦損傷后Bcl-2與Fas蛋白表達(dá)呈現(xiàn)一定的時(shí)相規(guī)律性,且實(shí)驗(yàn)組與死后損傷對(duì)照組間也存在顯著差異,因而檢測(cè)Bcl-2與Fas蛋白的表達(dá)不僅可以用于推斷腦損傷時(shí)間,還可作為鑒別生前與死后傷的參考指標(biāo),同時(shí)檢測(cè)二者的表達(dá)變化情況,能夠提高損傷時(shí)間