保幼激素類似物對甜菜夜蛾核多角體病毒增殖的影響.pdf

1、甜菜夜蛾核多角體病毒(Spodopteraexiguanuclearpolyhedrosisvirus，SeNPV)可有效防治甜菜夜蛾(SpodopteraexiguaHübner)。目前中山大學昆蟲學研究所利用該病毒已成功研制了甜菜夜蛾核多角體病毒殺蟲劑—“蟲瘟二號”，并實施產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)，但如何高效低成本增殖該病毒是當前產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)中亟待解決的問題。由于利用細胞培養(yǎng)大量增殖病毒成本太高，難以在病毒殺蟲劑大規(guī)模生產(chǎn)中應用，因此采取人工半合成

2、飼料飼養(yǎng)寄主昆蟲增殖病毒是當前國內外普遍使用的方法。就病毒增殖環(huán)節(jié)而言，主要應提高病毒的感染死亡率和單頭寄主病毒含量。影響上述兩個指標的因素很多，包括：昆蟲品系、感染齡期、毒株、接種濃度、飼料、濕度、溫度、光照、收獲病毒時間等。就寄主昆蟲感染齡期而言，多數(shù)研究表明，最適感染齡期在倒數(shù)第二齡，但在該齡期感染，幼蟲死亡時的生物量或體重并非最大。因此，如何在寄主獲得最大生物量后使其感染死亡是進一步提高病毒增殖產(chǎn)量的關鍵。保幼激素類似物(Juv

3、enilehormoneanalogue，JHA)是一類具有保幼激素活性的化合物，具有調控昆蟲變態(tài)和生長發(fā)育的作用。用JHA處理昆蟲幼蟲，可阻止幼蟲發(fā)生變態(tài)，延長幼蟲期甚至產(chǎn)生超齡幼蟲。鑒于此，本文用JHA處理甜菜夜蛾幼蟲，以延長幼蟲的歷期并使蟲體相對增大，從而達到提高病毒單位產(chǎn)量的目的，為今后利用JHA高效率、低成本增殖甜菜夜蛾核多角體病毒作為殺蟲劑提供理論依據(jù)和方法。 分別用2×106，2×107，2×108PIBs/mL三

4、種濃度的SeNPV感染甜菜夜蛾末齡幼蟲(第5齡)，并用保幼激素類似物methoprene8ug處理(處理劑量為8ug/頭)，以研究methoprene對SeNPV增殖的影響。結果表明：各處理組較對照組病毒總產(chǎn)量分別提高188％、160％和80％；平均單頭病毒含量分別提高126％、119％和37％；病毒感染死亡率分別提高26％、18％和15％。其中以2×107PIBs/mL感染5齡剛蛻皮甜菜夜蛾幼蟲，并于感染第1天滴加8μgmethopr

5、ene，病毒增殖產(chǎn)量最高，病毒總產(chǎn)量和平均病毒產(chǎn)量分別為4.18×1010PIBs和1.48×109PIBs/頭。以幼蟲的體重變化、取食量、食物消化率、食物轉化率、平均每克蟲尸病毒含量為指標，研究了methoprene和病毒對宿主消化生理的影響。結果表明，methoprene處理盡管提高了幼蟲取食量，但更顯著提高了寄主的食物轉化率和每克蟲尸的病毒含量。 使用SDS-PAGE及Western-blot方法，分析了methopren