肝康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究.pdf

1、目的:為控制肝康膠囊質(zhì)量，采用薄層色譜法對(duì)肝康膠囊處方中的組成藥味進(jìn)行定性鑒別。探索肝康膠囊中各成分的定性鑒別方法。建立肝康膠囊中有效成分的高效液相色譜含量測定方法。
　　 方法:
　　 1、肝康膠囊及原料藥材的定性鑒別:(1)鑒別藥味的選擇;(2)對(duì)照物的選擇;(3)供試品處理方法的選擇:比較不同提取方式、提取溶劑及提取時(shí)間對(duì)待測成分提取效率的影響，選擇能有效排除干擾、富集待測成分的提取方法。分別制備對(duì)照品溶液/對(duì)照藥

2、材溶液、陰性樣品溶液、肝康膠囊供試品溶液、原藥材供試品溶液。(4)薄層色譜條件的優(yōu)化:選用合適的固定相，優(yōu)化展開劑的組成、配比、展開環(huán)境等影響因素，確定最佳的色譜條件。(5)顯色或檢視條件的確定:選用簡便、可明顯的顯現(xiàn)并區(qū)別斑點(diǎn)的顯色劑或紫外光燈。(6)進(jìn)行專屬性實(shí)驗(yàn)，確保實(shí)驗(yàn)結(jié)果不受肝康膠囊中其它組成藥材中化學(xué)物質(zhì)的干擾。
　　 2、肝康膠囊的有效成分含量測定:(1)質(zhì)控指標(biāo)的選擇;(2)提取方法的選擇:選擇能有效排除干擾、富

3、集待測成分的提取方法;
　　 (3)確定色譜條件與系統(tǒng)適用性實(shí)驗(yàn):選用合適的色譜柱，優(yōu)化流動(dòng)相組成、配比及流速，使待測成分與其他峰完全分離;(4)進(jìn)行方法學(xué)考察;(5)樣品含量測定。
　　 結(jié)果:
　　 1、肝康膠囊及原料藥材的定性鑒別:(1)選取野生黑螞蟻、黃芪、十大功勞、五指毛桃根、羊蹄根、淫羊藿六味藥的定性鑒別列入肝康膠囊質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)。選用的對(duì)照物分別為黑螞蟻對(duì)照藥材、黃芪甲苷、鹽酸小檗堿、補(bǔ)骨脂素、大黃素、大

4、黃酚、淫羊藿苷對(duì)照品。對(duì)制劑中大棗的鑒別，雖進(jìn)行鑒別，但陰性有干擾，故不列入標(biāo)準(zhǔn)。(2)采用確定的薄層鑒別方法進(jìn)行試驗(yàn)，樣品在于對(duì)照品或?qū)φ账幉纳V相應(yīng)的位置處顯相同顏色斑點(diǎn)，陰性對(duì)照無干擾。
　　 2、肝康膠囊的有效成分含量測定:(1)根據(jù)肝康膠囊處方及中藥質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)制定原則，選擇黃芪中的黃芪甲苷、十大功勞中的鹽酸小檗堿、五指毛桃根中的補(bǔ)骨脂素、羊蹄根中的大黃素和大黃酚、淫羊藿中的淫羊藿苷作為質(zhì)控指標(biāo)進(jìn)行含量測定;(2)提取條件

5、:肝康膠囊中黃芪甲苷、補(bǔ)骨脂素、淫羊藿苷用甲醇超聲處理20 min可提取完全;鹽酸小檗堿用乙腈-水(3:7)冷浸30 min后超聲45 min可提取完全;大黃素和大黃酚用甲醇混勻振搖10 min可提取完全。五指毛桃根藥材經(jīng)60％乙醇加熱回流提取2h可提取完全;羊蹄根藥材經(jīng)甲醇冷浸30 min，超聲1h可提取完全;(3)最佳色譜條件:均采用十八烷基鍵合硅膠為填充劑的色譜柱，紫外檢測器;使用等度洗脫:黃芪甲苷、鹽酸小檗堿、補(bǔ)骨脂素、大黃素/

6、大黃酚、淫羊藿苷流動(dòng)相分別為:乙腈-水(30∶70)、乙腈-0.05 mol/L磷酸二氫鉀溶液(30∶70)、甲醇-水(45∶55)、甲醇-0.05％磷酸(85∶15)、乙腈-水(30∶70)，檢測波長分別為203 nm、265 nm、246 nm、254 nm、270nm;(4)黃芪甲苷、鹽酸小檗堿、補(bǔ)骨脂素、大黃素、大黃酚、淫羊藿苷分別在10.2-204μg/mL、22.5-225μg/mL，8.4-84μg/mL，25.6-256

7、μg/mL，24.8-248μg/mL，7.05-141μg/mL范圍內(nèi)具有良好線性相關(guān)性。各方法重現(xiàn)性良好，RSD分別為1.61、1.54、1.76、2.88、1.06、1.24％，加樣回收率分別為100.34、101.53、98.60、98.57、101.84、96.94％。肝康膠囊中六種成分的含量限度分別為每粒不得少于7.6496μg、85.264μg、11.632μg、31.192μg、238.608μg、0.28 mg。羊蹄根