三七總皂苷促進(jìn)卡壓性周圍神經(jīng)損傷再生的實驗研究.pdf

1、目的：探討三七總皂苷對周圍神經(jīng)卡壓松解術(shù)后，促進(jìn)周圍神經(jīng)再生的作用和機制。從而為臨床上更加合理的治療周圍神經(jīng)卡壓性疾病提供理論依據(jù)。 方法：選用健康的雌性SD大白鼠60只，體重150～200g，采用經(jīng)典的大鼠坐骨神經(jīng)慢性卡壓模型，0.3ml/100g氯氨酮腹腔內(nèi)注射麻醉，顯露右側(cè)大腿后側(cè)的坐骨神經(jīng)，用游標(biāo)卡尺測量其直徑平均為1.25mm。將內(nèi)徑為1.2mm、長5mm-段的柔軟硅膠管縱向切開后套在此處坐骨神經(jīng)上，7～0無創(chuàng)線縫合硅

2、膠管2針，鹽水沖洗后，窗口處滴入慶大霉素注射液0.4ml，預(yù)防感染。再用3/0絲線和I/O絲線分別縫合肌層和皮膚，創(chuàng)面暴露不覆蓋敷料。隨著大鼠的生長，坐骨神經(jīng)將逐漸被卡壓?？▔耗Ｐ椭谱魍戤吅?，隨機分為兩組，實驗組及對照組各30只，分籠喂養(yǎng)?？▔?個月后，將實驗動物切口重新打開，肉眼觀察坐骨神經(jīng)并測量其卡壓近端、遠(yuǎn)端和卡壓段的直徑，同時做肌電圖檢測。實驗組：神經(jīng)外膜松解同時在腹腔注射三七總皂苷注射液200mg.kg<'-1>.d<'-1>

3、，持續(xù)4周。對照組：行神經(jīng)外膜松解同時在腹腔注射等劑量生理鹽水。兩組動物4，8，12周取材前在顯微鏡下觀察毛細(xì)血管情況，卡壓段的直徑，之后行肌電圖檢查，取材后行光鏡、透射電鏡觀察。肌電圖檢查坐骨神經(jīng)卡壓段潛伏期及傳導(dǎo)速度；光鏡觀察變性的有髓纖維數(shù)、髓鞘、軸索、結(jié)締組織及血管再生情況；電鏡觀察神經(jīng)髓鞘、軸索、線粒體、微管、雪旺氏細(xì)胞核等超微結(jié)構(gòu)的變化。 結(jié)果：坐骨神經(jīng)卡壓90天可見卡壓處硅膠管表面被柔軟的結(jié)締組織包裹，但與硅膠管無

4、粘連。取出硅膠管后觀察坐骨神經(jīng)卡壓處變細(xì)，質(zhì)地變硬，卡壓處兩端增粗，形成神經(jīng)瘤樣改變，表面顏色蒼白。術(shù)后于第4，8，12周取材，卡壓段直徑逐漸增粗，神經(jīng)兩端增粗段隨時間的延長而逐漸縮小，4周時實驗組增粗明顯，統(tǒng)計學(xué)上有顯性差異，P<0.05。8、12周比較，實驗組增粗明顯，統(tǒng)計學(xué)上有顯著性差異，P<0.01。坐骨神經(jīng)卡壓3個月后，神經(jīng)傳導(dǎo)速度由51.94±1.03m/s下降至14.10±0.82 m/s。4，8，12周比較，兩組有顯著性

5、差異，P<0.01，實驗組傳導(dǎo)速度恢復(fù)較快。光鏡對照組術(shù)后4周時可見有髓纖維數(shù)增多，多為小的有髓神經(jīng)纖維，髓鞘較薄，仍有明顯的髓鞘脫失，可見髓鞘解體后形成的卵圓體。束間結(jié)締組織較多，炎性細(xì)胞明顯增多，血管增生。實驗組的有隨神經(jīng)纖維明顯增多，且粗大的纖維數(shù)目比例增加，髓鞘增厚較明顯，髓鞘解體少，未見卵圓體形成，束間結(jié)締組織明顯減少，炎性細(xì)胞稍有增多，血運豐富。術(shù)后8周時對照組有髓纖維數(shù)明顯增多，但粗大的纖維比例增加不大，髓鞘有所增厚，束間

6、結(jié)締組織減少，炎性細(xì)胞減少，神經(jīng)纖維間微血管管壁明顯增厚，內(nèi)皮細(xì)胞腫脹增生，柱狀凸起較多，微血管基底膜明顯增厚。實驗組8周時粗大的纖維顯著增多，髓鞘厚，髓索外觀完整，束間未見明顯的結(jié)締組織增生及炎性細(xì)胞增多，神經(jīng)纖維間的微血管管壁較薄，內(nèi)皮細(xì)胞無腫脹增生，腔面光滑，管腔大而通暢，血運豐富，神經(jīng)纖維趨向成熟。術(shù)后12周時對照組有髓纖維數(shù)目明顯增多，粗大纖維的比例增加，髓鞘增厚，髓鞘解體少見，束間結(jié)締組織減少，血管壁水腫減輕。實驗組粗大的神

7、經(jīng)纖維顯著增多，髓鞘厚，軸索外觀完整、清晰，束間未見纖維化，血管形態(tài)結(jié)構(gòu)正常，血運佳，神經(jīng)纖維發(fā)育成熟。各階段神經(jīng)軸索變性率，兩組比較有顯著性差異，P<0.01。實驗組明顯優(yōu)于對照組。電鏡術(shù)后4周時對照組，髓鞘重度增厚、變形，板層結(jié)構(gòu)松散、不規(guī)則，髓索變窄，索內(nèi)線粒體消失，僅見少量微絲；術(shù)后8周，髓鞘高度增厚，凸向髓索管腔，但不整形，板層狀結(jié)構(gòu)消失，線粒體，微絲，微管顯著減少，線粒體大部分嵴和胞膜融合消失；術(shù)后12周，線粒體高度水腫，嵴

8、模糊不清，個體空泡化，膜大部分破損，可見大量微絲，髓鞘板層較整齊，較規(guī)則。在術(shù)后4周的實驗組中，可見有髓神經(jīng)纖維，髓鞘高度增生，排列紊亂，形不整，可見到線粒體及少量微絲；術(shù)后8周，髓鞘結(jié)構(gòu)稍不規(guī)整，局部有分層，有線粒體，微絲，雪旺細(xì)胞及細(xì)胞核較少；術(shù)后12周，可見許多有髓神經(jīng)纖維，變性的有髓神經(jīng)纖維數(shù)相對少見，再生的有髓神經(jīng)纖維很多，髓鞘增厚顯著且排列歸整，板層結(jié)構(gòu)清晰，結(jié)締組織少見，軸突直徑較粗大，雪旺細(xì)胞、線粒體、微絲、微管等多見。

9、結(jié)果顯示：實驗組的電生理指標(biāo)，光、電鏡觀察神經(jīng)纖維的直徑、數(shù)目，髓鞘的厚度及纖維結(jié)締組織減少的程度均優(yōu)于對照組。 結(jié)論: 1 周圍神經(jīng)卡壓后，可引起嚴(yán)重的局部病理變化，故對于周圍神經(jīng)卡壓性疾病，一經(jīng)確診，就應(yīng)盡早手術(shù)。 2 神經(jīng)再生與周圍血供關(guān)系密切，因此，解除壓迫，改善局部血供，恢復(fù)神經(jīng)營養(yǎng)，可加速神經(jīng)再生。 3 周圍神經(jīng)卡壓松解術(shù)后應(yīng)用三七總皂苷，加速神經(jīng)周圍及自身血管再生，促進(jìn)營養(yǎng)物質(zhì)的輸送，提高了